阻斷ICOS共刺激通路抗肝移植急性排斥的研究.pdf

1、 本文第一部分目的是成功構(gòu)建針對大鼠活化T淋巴細(xì)胞可誘導(dǎo)共刺激分子(ICOS)基因編碼區(qū)的小干擾RNA(siRNA)表達(dá)質(zhì)粒pICOS，觀察其對大鼠活化T淋巴細(xì)胞表面ICOS表達(dá)的影響。方法：設(shè)計(jì)針對大鼠活化T淋巴細(xì)胞ICOS的siRNA，構(gòu)建重組干擾質(zhì)粒pICOS-A及其陰性對照質(zhì)粒pICOS-B，并經(jīng)酶切及測序鑒定，用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染大鼠T淋巴細(xì)胞，RT-PCR檢測其對T細(xì)胞ICOS基因表達(dá)的抑制作用。結(jié)論：大鼠ICOS的siRNA

2、具有明顯和特異性的抑制活化T淋巴細(xì)胞ICOS基因表達(dá)的作用。第二部分研究利用RNAi阻斷T淋巴細(xì)胞ICOS共刺激通路在大鼠原位肝移植急性排斥反應(yīng)中的作用。方法：將大鼠原位肝移植18例，隨機(jī)分成干擾組、排斥組和對照組，觀察各組BN鼠1周存活率，檢測CD25和ICOS在T細(xì)胞中的陽性率，檢測肝組織細(xì)胞凋亡情況，以及T細(xì)胞ICOS基因的表達(dá)，并檢測T細(xì)胞ICOS蛋白的表達(dá)和血清TNF-α、IFN-γ含量。結(jié)論：應(yīng)用RNAi技術(shù)，術(shù)中回輸已轉(zhuǎn)染