2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩94頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、青蒿素(artemisinin)是從青蒿(Artemisia annua L.)中提取出的一種倍半萜內(nèi)酯,目前被廣泛應(yīng)用于瘧疾的治療。青蒿素在青蒿體內(nèi)的含量很低,為了滿足市場(chǎng)的需求,迫切需要提高青蒿體內(nèi)青蒿素的含量。青蒿素特異地在青蒿的油性腺毛中合成并貯存,腺毛特異性啟動(dòng)子對(duì)于青蒿素腺毛代謝工程具有重要的應(yīng)用價(jià)值。
  青蒿紫穗槐二烯合成酶(Amorpha-4,11-diene Synthase, ADS)是青蒿素合成途徑的關(guān)系酶

2、,其在青蒿油性腺毛(不包括T字型腺毛)中特異表達(dá)。因此,能夠啟動(dòng) ADS基因轉(zhuǎn)錄的ADS啟動(dòng)子是否也具有腺毛特異性則有待研究。
  本研究從青蒿中克隆了全長(zhǎng)2935 bp的ADS啟動(dòng)子,借助于GUS報(bào)告系統(tǒng),通過將該啟動(dòng)子在青蒿中進(jìn)行同源表達(dá)、在擬南芥(Arabidopsis thaliana)中進(jìn)行異源表達(dá)以及缺失分析后,得到以下研究結(jié)果及結(jié)論:
  一、ADS啟動(dòng)子在青蒿及擬南芥中均具有腺毛特異性。
  青蒿和擬南

3、芥的腺毛在結(jié)構(gòu)及功能上均有較大差別:青蒿的腺毛為多細(xì)胞油性腺毛,而擬南芥的為單細(xì)胞非油性腺毛。盡管如此, GUS染色結(jié)果表明,轉(zhuǎn)ADS啟動(dòng)子的青蒿及擬南芥中GUS染色均特異地局限于腺毛中,而在葉片的其他部位觀察不到任何染色。這一結(jié)果與ADS基因在青蒿的腺毛中特異表達(dá)這一現(xiàn)象吻合,同時(shí)說明 ADS啟動(dòng)子的腺毛特異性具有跨物種性。
  二、ADS啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游-350 bp至-300 bp這一區(qū)段可能含有決定ADS啟動(dòng)子腺毛特

4、異性的關(guān)鍵元件。
  ADS啟動(dòng)子全長(zhǎng)2935 bp,而將其從5’端缺失到轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游-350 bp處時(shí),缺失后片段在擬南芥中仍然保持著腺毛特異性;但當(dāng)繼續(xù)缺失到-300 bp時(shí),腺毛特異性消失,取而代之的是其下游報(bào)告基因在整個(gè)葉片中都有表達(dá)。由此可推測(cè),-350 bp至-300 bp這一區(qū)段可能含有決定ADS啟動(dòng)子腺毛特異性的關(guān)鍵順式作用元件。
  三、與全長(zhǎng)ADS啟動(dòng)子相比,缺失ADS啟動(dòng)子片段的轉(zhuǎn)基因擬南芥腺毛特異

5、性表達(dá)植株率明顯降低。
  本研究中,對(duì)于全長(zhǎng)ADS啟動(dòng)子或一個(gè)缺失ADS啟動(dòng)子片段,其轉(zhuǎn)基因擬南芥植株中呈現(xiàn)出腺毛特異性表達(dá)的植株數(shù)與所有陽性植株總數(shù)的比值為其轉(zhuǎn)基因擬南芥腺毛特異性表達(dá)植株率。研究發(fā)現(xiàn),與全長(zhǎng)ADS啟動(dòng)子相比,缺失 ADS啟動(dòng)子片段的轉(zhuǎn)基因擬南芥腺毛特異性表達(dá)植株率都有明顯的降低:全長(zhǎng)的植株率為70%左右,而缺失片段中Δ-800和Δ-550的僅有約1/5,其中植株率最高的Δ-400也僅有45.83%。這一結(jié)果表

6、明 ADS啟動(dòng)子腺毛特異性的背后有著未知且復(fù)雜的調(diào)控機(jī)制。
  四、缺失ADS啟動(dòng)子片段的啟動(dòng)活性普遍高于全長(zhǎng)ADS啟動(dòng)子的啟動(dòng)活性。
  通過對(duì)轉(zhuǎn)基因擬南芥進(jìn)行 GUS活性定量檢測(cè),研究發(fā)現(xiàn)Δ-800、Δ-600、Δ-550、Δ-500、Δ-450、Δ-400和Δ-350這7種腺毛特異性缺失ADS啟動(dòng)子片段轉(zhuǎn)基因擬南芥的GUS活性均顯著性高于全長(zhǎng) ADS啟動(dòng)子轉(zhuǎn)基因擬南芥的GUS活性,其中Δ-350的最高,為全長(zhǎng)ADS啟動(dòng)

7、子的3.27倍,而Δ-400的最低,為2.09倍;另外Δ-350轉(zhuǎn)基因擬南芥的GUS活性也顯著高于Δ-400的。這一結(jié)果說明ADS啟動(dòng)子-800 bp的上游可能存在負(fù)調(diào)控的區(qū)域,另外-400 bp至-350 bp之間也可能存在負(fù)調(diào)控區(qū)域。
  本研究通過對(duì)ADS啟動(dòng)子的分析,得到一系列缺失ADS啟動(dòng)子片段,其中最短的僅417 bp(Δ-350)。這些片段的啟動(dòng)活性均高于全長(zhǎng)ADS啟動(dòng)子,但仍然保持著腺毛特異性,它們對(duì)于深入研究腺毛

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論