神經干細胞移植治療大鼠糖尿病神經原性膀胱的實驗研究.pdf

1、實驗目的:
　　研究神經干細胞移植修復大鼠糖尿病神經原性膀胱功能的效果,為進一步探討其可能機制提供基礎。
　　實驗方法:
　　1.從新生鼠海馬組織分離培養(yǎng)神經干細胞,觀察神經干細胞及其傳代細胞的形態(tài)、生長特點,并通過免疫細胞化學染色以及熒光顯微鏡等鑒定神經干細胞及其誘導分化情況。
　　2.一次性腹腔注射60mg/kgSTZ制備大鼠糖尿病神經原性膀胱模型,觀察大鼠體重及空腹尾靜脈血糖變化,8周后檢測其尿流率、尿流曲

2、線等尿流動力學參數(shù)改變情況,病理切片觀察其膀胱病理改變情況。
　　3.腹腔內注射胰島素控制模型大鼠血糖,平穩(wěn)后,將模型大鼠再隨機分為2組:分別通過股靜脈注射、膀胱肌肉注射移植神經干細胞,8周后通過尿流動力學、膀胱神經電生理及免疫組化比較其與陽性對照組膀胱功能改善及膀胱組織MAP-2、GFAP陽性表達情況。
　　實驗結果:
　　1.從新生鼠海馬組織分離培養(yǎng)出的神經球,呈懸浮生長,Nestin陽性;誘導后大量細胞從神經球中

3、遷出,可得到MAP-2陽性的神經元細胞、GFAP陽性的星形膠質細胞。
　　2.注射STZ后大鼠出現(xiàn)煩渴多飲、易激惹、多食、多尿等典型糖尿病癥狀,體重明顯減輕,空腹尾靜脈血糖明顯升高,均≥16.9mol/L。尿流動力學檢測示最大膀胱容量增大,最大膀胱內壓降低,殘余尿增多,膀胱順應性增高;尿流動力學曲線圖顯示需依靠腹壓完成膀胱排尿,逼尿肌收縮力弱;膀胱HE染色示膀胱逼尿肌纖維排列紊亂,肌細胞肥大,形態(tài)各不相同。
　　3.血糖平穩(wěn)

4、后,NSCs通過膀胱肌肉注射移植后,大鼠糖尿病神經原性膀胱的尿流動力學參數(shù)比陽性對照組有一定改善(P<0.05),膀胱神經電生理示神經傳導有所恢復。而股靜脈注射組與陽性對照組相比較,膀胱神經傳導及膀胱排尿功能均無改善(P>0.05)。膀胱免疫組化染色示膀胱肌肉注射移植NSCs后,其MAP-2、GFAP陽性表達增加。
　　結論:
　　1.新生鼠海馬組織可分離培養(yǎng)出豐富的NSCs。
　　2.NSCs能在體外大量增殖并穩(wěn)定傳