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1、中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文H1N2亞型豬流感病毒進(jìn)化分析及抗HA蛋白單克隆抗體的制備姓名:張飛申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師:?jiǎn)虃髁?0080601AbstractSwineinfluenzavirus(SIV)isoneofimportantpathogensthatcauserespiratorydiseaseinpigsAtpresent,thesubtypesofSIVincludesHINI,H1N2,H1N7,H
2、2N3,H3N1,H3N2,H3N6,H4N6,H5NIandH9N2SeveralreassortantH1N2SIVstrainswereisolatedfromsomeprovincesinrecentyears,sincethefirstH1N2SIVstrainWasisolatedinChinain2004Whetherornotallepidemicswineinfluenzadiseaseinducedbythesevi
3、ruseswouldbreakOutinpigsshouldbefurtherstudiedInthepresentstudy,thespecificprimersforRT—PCRandsequencingweredesignedbasedonthepreferencesequencesofHlN2virusesAlltheeightgenefragmentsofSW/HeB/10/06andSW/T3/I/07aresequence
4、dandgeneticallyanalysisedwithbioinformaticsoftwaresResultsofgeneticanalysisshowedthatSW/HeB/10/06andSW/TJ/I/07arefarinrelativesHomologyofeightgenefragmentsofthetwostrainsis:PB2814%,PBl832%,PA83O%,HA901%,NP816%,NA917%,M84
5、1%,NS804%HAandNAgenefragmentsofSW/TJ/I/07showshighesthomologywithcorrespondinggenesofSW/ZJ/I/04(HIN2),andotherinternalgenefragmentswithtWOHIN1SIVstrainsineuropeHA,NAandNSgenefragmentsofSW/HeB/10/06showshiighesthomologywi
6、thA/Turkey/MO/24093/99,andotherinternalgenefragmentswithHINIhumaninfluenzavirus,H3N2andH1N2swineinfluenzastrainsSW/HeB/l0/06iSprovedtobeanewreassortedvirusdifferentfromotherH1N2SIV,whichiSthefirstHIN2SIVincludinghumanavi
7、anandswineinfluenzagenesinmainlandWeproceedHItestamong4H1influenzavirusesandserumAccordingtotheresultsSW/HeN/II/05WasselectedtObepropagatedinembryonatedeggsAllantoicfluidswereharvestedandpuriedMixedwithFreundsadjuvantthe
8、viruseswereinjectedintoBALB/cfemalemiceTwomonoclonalantibody(McAb)hybridomacellstrainsweredevelopedbyfusingSP2/0cellswithspleencellsofmousethathadbeenimmunizedwithSIVSW/HeN/1I/05(H1N1)Clonedseveraltimes,positivehybridoma
9、cellsstrains4E682,3El1C4weredeterminedbyHIandELISAInHItest,ThetwoantibodiesshowspecificactivityinHI,noactivitywithH3,H5andH9swineinfluenzavirusandotherpathogensofswineInsummarygeneticrelationshipofthesetwoSIVstainswerean
10、alysedinthestudyTheresultsshowedthatthetwonewreassortedSIVstrainswerefarinrelativesThestrainsSW/TJ/I/07andSW/HeB/10/06providesevidenceforproducingnewreassortedinfluenzaviruseswithpigasavesselMeanwhile,twomonoclonalantibo
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