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文檔簡介
1、艾拉莫德(T-614),是一種尚未上市的非甾體抗炎藥(NSAIDs),研究表明,它對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和骨關(guān)節(jié)炎有明顯的治療作用,但迄今尚未有文獻(xiàn)報道T-614對肺部炎癥的影響。本文從NF-κB途徑、p38 MAPK信號通路及炎癥因子表達(dá)方面研究了T-614對脂多糖(LPS)介導(dǎo)的肺泡巨噬細(xì)胞炎癥過程的作用,同時在整體水平利用動物急性肺損傷(ALI)模型研究了T-614對肺損傷的干預(yù)作用。 1.T-614對LPS激活的大鼠肺泡巨噬
2、細(xì)胞系NR8383的作用: 體外培養(yǎng)NR8383經(jīng)不同濃度的T-614處理,LPS刺激后應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測細(xì)胞上清中TNF-α的水平,半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)rRT-PCR)檢測TNF-αmRNA水平,ELISA法檢測NF-κB的活性,western blotting法檢測磷酸化p38 MAPK的表達(dá)。結(jié)果表明T-614對LPS誘導(dǎo)的NR8383細(xì)胞TNF-αmRNA水平和蛋白水平的上調(diào)有顯著抑制作用,對NF
3、-κB的轉(zhuǎn)錄活性也有抑制作用,但對p38 MAPK磷酸化程度無明顯作用。 2.T-614對大鼠油酸型ALI模型的干預(yù)作用: 本研究首次應(yīng)用大鼠油酸型ALI動物模型研究T-614的體內(nèi)效應(yīng)。T-614于造模前給藥,劑量為20、40、80mg/kg,造模后利用動物肺功能測定儀實(shí)時測定肺損傷過程中肺容量(V)和動態(tài)肺順應(yīng)性(Cdyn)的變化,并收集支氣管肺泡灌洗液(BALF),檢測灌洗液中蛋白濃度的變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)T-614可
4、顯著改善油酸型肺損傷大鼠的肺功能,明顯降低灌洗液中蛋白濃度,表明T-614對油酸所致大鼠ALI具有保護(hù)作用。 本研究結(jié)果表明T-614可抑制LPS誘導(dǎo)的大鼠肺泡巨噬細(xì)胞系NR8383表達(dá)TNF-α,此作用可能通過干預(yù)NF-κB活性而非p38 MAPK實(shí)現(xiàn);另外,T-614對油酸型ALI大鼠的肺容量、動態(tài)肺順應(yīng)性及灌洗液中蛋白濃度的影響表明T-614對大鼠油酸型ALI具有一定的保護(hù)作用。因此我們推測:T-614可能通過對NF-κB
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