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1、該課題首先建立人巨噬細(xì)胞系U937和人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系ECV-304的共培養(yǎng)模型,然后以刀豆蛋白A(ConA)為巨噬細(xì)胞刺激劑,在倒置顯微鏡下觀察巨噬細(xì)胞對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)學(xué)的影響;采用<'3>H-TdR摻入法觀察其對(duì)DNA合成的影響;采用流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞周期的變化;同時(shí)采用RT-PCR研究巨噬細(xì)胞對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞靶基因HOXB2和VEGF受體KDR表達(dá)的影響;用免疫熒光技術(shù)檢測(cè)血管內(nèi)皮細(xì)胞膜上整合素受體ανβ3的表達(dá)變化.結(jié)果表明:C
2、onA刺激的U937細(xì)胞使內(nèi)皮細(xì)胞間隙變大,胞體出現(xiàn)類似神經(jīng)元樣的突起,形態(tài)不一;使內(nèi)皮細(xì)胞S期明顯增加;使內(nèi)皮細(xì)胞VEGF受體KDR和HOXB2基因mRNA的表達(dá)水平明顯上調(diào);使內(nèi)皮細(xì)胞膜上整合素受體ανβ3表達(dá)明顯增加.通過(guò)該研究得出以下結(jié)論:1.活化的巨噬細(xì)胞可以通過(guò)影響血管內(nèi)皮細(xì)胞的形態(tài)、細(xì)胞周期、VEGF受體KDR及HOXB2的表達(dá)來(lái)促進(jìn)其增殖和遷移.2.活化的巨噬細(xì)胞可以增強(qiáng)血管內(nèi)皮細(xì)胞與基質(zhì)的黏附.3.活化的巨噬細(xì)胞通過(guò)促
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