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文檔簡介
1、第一部分慢性LPS的制備及影響因素
目的:通過建立慢性LPS大鼠模型,觀察大鼠行為學(xué)表現(xiàn)、模型鼠點燃成功率、死亡率及其影響因素,為在該模型中進行癲癇相關(guān)的基礎(chǔ)研究和抗癲癇藥物療效的評價和篩選提供經(jīng)濟可靠的研究載體。方法:50只清潔級雄性SD大鼠,除6只正常對照組外,其余參與造模,予以腹腔注射氯化鋰127mg·kg-1(3mmol·kg-1),18h~24h后,給予匹羅卡品30mg·kg-1腹腔注射。結(jié)果:本實驗造模成功率8
2、6%,死亡率14%,點燃成功并存活的大鼠中出現(xiàn)SRS率占75%。結(jié)論:用鋰-匹羅卡品制備SD大鼠慢性癲癇模型,匹羅卡品的用量經(jīng)多劑量預(yù)實驗結(jié)果提示為30mg·kg-1時,鋰-匹羅卡品大鼠慢性癲癇模型成功率更高,動物的死亡率更低,操作簡單,是一種較穩(wěn)定、經(jīng)濟的慢性LPS模型,適用于抗癲癇藥物的篩選研究。
第二部分 RAE、VPA對LPS海馬C-fos蛋白表達的影響及意義
目的:通過LPS慢性點燃大鼠模型觀察致癇
3、大鼠C-fos蛋白免疫反應(yīng)陽性細胞在RAE不同劑量級、VPA干預(yù)后不同研究時間點海馬CA1、CA3及DG區(qū)的表達,探索C-fos蛋白在癲癇發(fā)病機制中的作用和RAE抗癲癇效應(yīng)的可能作用機制。方法:(1)清潔級健康成年雄性SD大鼠126只,除正常對照組6只外,余120只均為造模成功后存活的LPS大鼠;(2)按隨機化原則分為模型組、VPA干預(yù)組、RAEL干預(yù)組、RAEM干預(yù)組、RAEH干預(yù)組(各24只),再按不同時間點分為4個亞組,每個時間點
4、6只大鼠;(3)分組后正常對照組、模型對照組分別灌胃給予等容積的生理鹽水,其余各組灌胃給予不同劑量的RAE溶液;(4)采用免疫組織化學(xué)和圖像分析技術(shù)方法觀察實驗鼠海馬CA1、CA3及DG區(qū)C-fos免疫反應(yīng)陽性細胞表達。結(jié)果:(1)模型組大鼠海馬區(qū)C-fos免疫反應(yīng)陽性細胞在1d、7d表達顯著增加,28d恢復(fù)并接近正常對照組表達水平。(2)RAE中高劑量、VPA干預(yù)后對C-fos免疫反應(yīng)陽性細胞表達均有顯著下調(diào),與模型組比較有統(tǒng)計學(xué)意義
5、(P<0.05),但三者之間比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05);低劑量組(RAE干預(yù)組)表達有顯著下調(diào)趨勢,但與模型組比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論:(1)LPS模型在急、慢性期均存在顯著的海馬神經(jīng)元結(jié)構(gòu)損傷,可見到海馬各區(qū)C-fos的表達呈雙相性改變,這種變化可能與模型鼠癲癇的自限性反復(fù)發(fā)作機制和C-fos蛋白的正反饋抑制有關(guān);(2)RAE中高劑量顯著下調(diào)LPS模型鼠海馬神經(jīng)元C-fos免疫反應(yīng)陽性細胞表達,推測可能是其重要的抗
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