新生期結(jié)直腸刺激對(duì)幼鼠內(nèi)臟痛敏感性的影響及脊髓c-fos蛋白的表達(dá).pdf

1、目的：采用行為學(xué)和電生理評(píng)價(jià)方法，探討新生期傷害性結(jié)直腸擴(kuò)張刺激(CI)對(duì)幼鼠內(nèi)臟痛覺敏感性影響，并建立幼鼠內(nèi)臟痛覺高敏感模型。通過觀察內(nèi)臟高敏感幼鼠腰骶段脊髓背角c-fos蛋白表達(dá)，探討幼鼠出現(xiàn)內(nèi)臟痛覺高敏的作用機(jī)制。 方法：[1]32只SD乳鼠隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，每組16只；實(shí)驗(yàn)組乳鼠出生第8天開始給予CI，每日1次，連續(xù)7d，對(duì)照組不給予CI，常規(guī)飼養(yǎng)到幼鼠期(6周齡)進(jìn)行下列研究：①結(jié)直腸擴(kuò)張(CRD)刺激下腹壁撤退

2、反射(AWRl)和痛閾測(cè)定評(píng)估腸道痛覺敏感性；②降結(jié)腸病理學(xué)檢查；⑧CRD刺激下腹外斜肌放電法評(píng)估腸道痛覺敏感性。[2]32只SD乳鼠按析因設(shè)計(jì)分成4組，每組8只，A組為模型組并在6周齡時(shí)接受CRD，B組為模型組，6周齡未給予CRD，C組為對(duì)照組，6周齡接受CRD，D組為對(duì)照組，6周齡未給予CRD。A、C組幼鼠CRD接受刺激后2小時(shí)和B、D組幼鼠留取L<,6>至S<,2>脊髓，應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色及計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行脊髓Fos陽性(

3、FLI)細(xì)胞數(shù)和灰度積分值半定量分析。采用SPSS11.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，α=0.05為顯著性檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。 結(jié)果：[1]隨CRD增加，幼鼠AWR評(píng)分增加：AWR評(píng)分受新生期接受CI(造模)及性別影響(F值為45.19、7.44，p<0.05)，AWR評(píng)分雌性明顯高于雄性，實(shí)驗(yàn)組明顯高于對(duì)照組，性別與造模有明顯交互作用(F=4.66，p=0.040)：實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組AWR評(píng)分在CRD20、40mmHg時(shí)差異明顯，CRD60、80

4、mmHg時(shí)差異不明顯。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組幼鼠痛閾值為26.5±4.9mmHg、47.8±5.0mmHg(F=149.753，p<0.01)。[2]隨CRD增加，幼鼠腹外斜肌放電波幅增加；腹外斜肌放電波幅受造模及性別影響(F值為7.09、5.95，p<0.05)；腹外斜肌放電波幅雌性明顯高于雄性，實(shí)驗(yàn)組明顯高于對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組腹外斜肌放電幅值在CRD30、45mmHg時(shí)有明顯差異，CRD 60mmHg、75mmHg時(shí)差異不明顯。兩組幼鼠

5、體重?zé)o差異，降結(jié)腸未見明顯病理組織損傷。[3]新生期CI和幼鼠6周齡時(shí)CRD均可使幼鼠腰骶段脊髓背角FLI細(xì)胞數(shù)顯著升高，F(xiàn)LI灰度積分值顯著降低，差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；CI和CRD對(duì)脊髓背角FLI灰度積分值的影響有交互作用。 結(jié)論：新生期持續(xù)CI可造成幼鼠痛閾下降，出現(xiàn)慢性內(nèi)臟高敏感性，且沒有明確的組織病理學(xué)改變，為幼鼠內(nèi)臟高敏性模型。與行為學(xué)評(píng)價(jià)相比，電生理評(píng)價(jià)方法為定量檢測(cè)，能較為客觀反映動(dòng)物內(nèi)臟痛覺的致敏效應(yīng)，特別適用于幼