健胃益氣湯對(duì)胃粘膜損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、胃粘膜損傷是臨床常見病和多發(fā)病，包括胃炎和胃潰瘍等，通常認(rèn)為主要是胃粘膜的攻擊因子和防御因子失衡所造成的。在藥物治療胃粘膜損傷方面，中藥方劑一直都占有重要地位，自制健胃益氣湯臨床觀察對(duì)胃炎和胃潰瘍具有較好療效，但其作用機(jī)制尚不十分清楚。 目的建立無水乙醇致大鼠胃粘膜損傷試驗(yàn)?zāi)Ｐ?，研究預(yù)先給予健胃益氣湯對(duì)大鼠胃粘膜損傷的保護(hù)作用及其對(duì)胃粘膜組織細(xì)胞凋亡的影響的作用機(jī)制，為臨床推廣應(yīng)用該方治療胃粘膜損傷提供科學(xué)理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

2、 方法1.建立動(dòng)物模型：本實(shí)驗(yàn)取雄性Wistar大鼠40只，隨機(jī)分4組，中藥組、西藥組、試驗(yàn)對(duì)照組、正常對(duì)照組。中藥組給予健胃益氣湯(10ml/kg)，西藥組給予麗珠得樂懸浮液(10ml/kg)，兩對(duì)照組給予等體積的生理鹽水，分別灌胃，每日一次，連續(xù)四天。取材前禁食24小時(shí)，末次給藥后30分鐘，前三組分別無水乙醇灌胃(1mg/只)，1小時(shí)后連同正常對(duì)照組，輕度乙醚麻醉后一同處死，解剖取胃。2.形態(tài)學(xué)觀察：①測(cè)量胃粘膜損傷指數(shù)。②取腺胃

3、區(qū)組織制作切片并作H-E及PAS染色，光學(xué)顯微鏡觀察胃粘膜組織的病理變化。3.用免疫組織化學(xué)ABC法對(duì)大鼠胃粘膜組織細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax等做免疫組織化學(xué)研究，檢測(cè)并通過圖像分析對(duì)以上結(jié)果進(jìn)行定性、定位、定量分析及統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，研究Bcl-2、Bax的表達(dá)與胃粘膜損傷的關(guān)系以及健胃益氣湯對(duì)胃粘膜細(xì)胞凋亡的影響。 結(jié)果除正常對(duì)照組外，無水乙醇使各組大鼠均有糜爛或出血點(diǎn)形成，而中藥(健胃益氣湯)組的糜爛、出血明顯減少，較試

4、驗(yàn)對(duì)照組為輕。中藥組損傷指數(shù)為26.87±6.84，與試驗(yàn)對(duì)照組的98.33±15.36比較有顯著差異(P＜0.01)。鏡檢H-E組織切片顯示，試驗(yàn)對(duì)照組粘膜損傷明顯，并有大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。中藥組粘膜損傷較輕，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)少，與試驗(yàn)對(duì)照組比較有顯著差異(P＜0.01)。另外，通過光鏡觀察Alcian-PAS染色切片，中藥組大鼠的粘液PAS陽性面積較多，粘膜PAS反應(yīng)陽性層較厚，與試驗(yàn)對(duì)照組比較，其差異具有顯著性意義(P＜0.01)。經(jīng)免

5、疫組化染色，檢測(cè)并用計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)定量分析，發(fā)現(xiàn)中藥組的Bax蛋白表達(dá)降低，Bcl-2蛋白表達(dá)增加，與試驗(yàn)對(duì)照組比較，有顯著性差異(P＜O.01)。 結(jié)論1.中藥健胃益氣湯預(yù)防用藥能減小胃粘膜損傷指數(shù)，減少炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，增加粘膜粘液含量及厚度，表明了健胃益氣湯良好的抗炎，抗胃粘膜損傷，增強(qiáng)胃粘膜保護(hù)和修復(fù)的能力。2.給予中藥健胃益氣湯下調(diào)了Bax蛋白表達(dá)和上調(diào)了Bcl-2蛋白表達(dá)，增高了Bcl-2/Bax，從而抑制了細(xì)胞凋亡