保護素D1對急性肺損傷的治療作用及機制研究.pdf

1、第一部分保護素D1對小鼠急性肺損傷的保護作用
　　目的：研究保護素D1(PD1)對脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的小鼠急性肺損傷的影響及機制。
　　方法：40只雄性BABL/C小鼠隨機分為正常對照組(NS組)、急性肺損傷組(LPS組),PD1組(P組)、PD1預(yù)先給藥組(PL組)四組,每組各10只。P組和PL組尾靜脈給予200ng的PD1預(yù)處理,NS組和LPS組則給予等體積的生理鹽水,30min后LPS組和PL組以3mg/kg的LPS

2、氣管內(nèi)滴入,NS組和P組則給予等體積的生理鹽水。氣管內(nèi)滴入LPS或生理鹽水后24小時處死小鼠,檢測肺組織濕/干質(zhì)量比(W/D)、髓過氧化物酶(MPO)活性、支氣管肺泡灌洗液(BALF)中白細胞總數(shù)、蛋白含量及TNF-α、IL-10的水平,HE染色光鏡下觀察肺組織病理學(xué)變化。
　　結(jié)果：與NS組相比,LPS組肺組織出現(xiàn)病理學(xué)改變,且W/D、MPO活性(u/g)、BALF中白細胞總數(shù)(104/ml)、蛋白含量(g/L)、TNF-α濃度

3、(pg/ml)均顯著升高(W/D:4.69±0.09比3.57±0.12;MPO:7.03±0.38比2.16±0.25;白細胞總數(shù):71.8±6.8比4.5±0.5;蛋白含量:0.186±0.005比0.068±0.007;TNF-α:567±68.22比201.67±57.12,均P<0.05),BALF中IL-10濃度(pg/ml)顯著降低(55.5±18.8比187.2±14.5,P<0.01);與LPS組相比,PL組肺組織病理

4、學(xué)改變明顯減輕,且W/D、MPO活性、BALF中白細胞總數(shù)、蛋白含量、TNF-α濃度均明顯降低(W/D:4.37±0.06,MPO:3.73±0.24,白細胞總數(shù):33.7±2.4,蛋白含量:0.115±0.008,TNF-α:414±28.51,均P<0.05),BALF中IL-10濃度(113.6±5.8,P<0.01)顯著升高。NS組與P組間各指標比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05)。
　　結(jié)論：保護素D1可以減輕脂多糖誘

5、導(dǎo)的小鼠急性肺損傷,其機制可能與其抑制中性粒細胞聚集,調(diào)節(jié)促炎因子及抗炎因子平衡有關(guān)。
　　第二部分保護素D1對脂多糖致內(nèi)皮細胞損傷的保護作用
　　目的：研究保護素D1對血管內(nèi)皮損傷的作用及其機制。
　　方法：體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細胞,取生長良好的細胞分別加入不同濃度的PD1(終濃度10nmol/L、50nmol/L、100nmol/L)預(yù)處理及脂多糖(終濃度1mg/L)進行干預(yù),并設(shè)空白對照組。MTT法檢測細胞活力,

6、RT-PCR方法檢測細胞間粘附分子-1(ICAM-1)mRNA表達水平,熒光探針DCFH-DA測定細胞內(nèi)活性氧(ROS)水平。
　　結(jié)果：PD1與脂多糖同內(nèi)皮細胞孵育后沒有引起細胞活力的明顯變化(P>0.05),排除了實驗?zāi)Ｐ椭兴幬锏亩拘宰饔?。與空白對照組相比,血管內(nèi)皮細胞經(jīng)LPS刺激后胞內(nèi)ROS水平及ICAM-1mRNA的表達明顯升高,50nmol/L、100nmol/L的PD1分別可使LPS誘導(dǎo)的ROS產(chǎn)生減少15％、45%(