黃芪及清開靈注射液對急性肺損傷大鼠的治療作用及機制的研究.pdf

1、目的：研究中藥制劑黃芪注射液(Astragalus Membranous injectiong)和清開靈注射液(Qingkailing injection)對內毒素(Lipopolysaccharide,LPS)誘導的急性肺損傷(Acute Lung Injury,ALI)治療的作用,并探討其作用機制。 方法：建立ALI動物模型，40只SD雄性大鼠，體重（360±60）g，隨機分5組，對照組（normal group）、模型組（

2、model group）、黃芪組（astragalus membranous group）、清開靈組(Qingkailing group)和黃芪注射液和清開靈注射液聯(lián)合組(combined group)，每組8只；暴露尾靜脈，各組注藥均從尾靜脈注入；對照組：注入1mL生理鹽水，模型組、黃芪組、清開靈組和聯(lián)合組，均將LPS 5mg/kg溶解于1mL生理鹽水注入；注入LPS45min后，黃芪組、清開靈組和聯(lián)合組分別注入，黃芪注射液0.5g/

3、kg加生理鹽水稀釋成1mL、清開靈注射液0.05ml/kg加生理鹽水稀釋成1mL、黃芪注射液0.5g/kg加生理鹽水稀釋成0.5mL和清開靈注射液0.05ml/kg加生理鹽水稀釋成0.5mL。從第一次注液起5h后，腹主動脈(abdominal aorta)取血（1：500u肝素抗凝）行血氣分析（blood gas analyse），并取血2ml（1：500u肝素抗凝）行流式細胞學檢測，腹主動脈放血處死大鼠；肺組織肉眼觀察和200倍光鏡下

4、觀察；取大鼠右下肺組織稱取濕重(wet weight，WW)、干重(dye weight，DW)，計算濕/干重比(rate of wet weights to dye weights，W/D)；免疫組化法檢測各組肺組織腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和白細胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的表達，病理圖像分析系統(tǒng)測定肺組織中TNF-α和IL-1β的平均灰度值；流式細胞儀

5、（flow cytometry）測大鼠外周血中CD4+數(shù)目細胞、CD8+細胞數(shù)目及CD4+/ CD8+的比值。 結果：本實驗40只大鼠無脫失、死亡，全部進入結果分析。 ①肺組織肉眼觀察可見：對照組大體觀察表面光滑，呈淡粉紅色無充血水腫及梗死灶；模型組大體觀察肺組織呈現(xiàn)暗紅色，肺包膜下明顯充血水腫，廣泛出血點；黃芪組大體觀察肺組織有充血水腫，有出血點，但較模型組少；清開靈組和聯(lián)合組大體觀察類似黃芪組。200倍光鏡下HE染色

6、觀察可見：對照組肺組織結構清晰，無充血滲出，未見明顯炎性細胞浸潤；模型組肺組織可見肺微血管充血、出血、微血栓形成，肺間質和肺泡內有水腫液和炎癥細胞浸潤，部分可見灶狀肺不張；黃芪組肺組織可見肺微血管充血、出血、微血栓形成及炎癥細胞浸潤，但比模型組稍輕；清開靈組和聯(lián)合組200倍光鏡下觀察類似黃芪組。 ②與對照組比較，其他組的WW、DW、W/D均有顯著增加（P﹤0.05）；模型組的WW、DW最重，W/D值最大，模型組與其他組比較差異均

7、有顯著性（P﹤0.05）；清開靈組的WW、DW、W/D和黃芪組的對比差別不大（P＞0.05）；聯(lián)合組DW較清開靈組的DW有所減低（P﹤0.05），清開靈組與聯(lián)合組的WW、W/D差異無顯著性（P＞0.05）；黃芪組的WW、DW、W/D與聯(lián)合組的比較差異無顯著性（P＞0.05）。 ③ PaCO2在各組中均變化不大（P＞0.05）；對照組的pH值、PaO2、PaO2/FiO2與其他組的比較差異均有顯著性（P﹤0.01），其中pH較對照

8、組值升高，PaO2和PaO2/FiO2較對照組降低；與模型組比較，清開靈組、黃芪組、聯(lián)合組PaO2和PaO2/FiO2有顯著增加（P﹤0.05），聯(lián)合組增加更加顯著（P﹤0.01）；黃芪組、清開靈組和聯(lián)合組間比較差異無顯著性（P＞0.05）。 ④對照組TNF-α和IL-1β的表達與其他4組比較差異均有顯著性（P﹤0.05），對照組TNF-α和IL-1β均表達最低；模型組組TNF-α和IL-1β的表達最高與其它組比較差異均有顯著性

9、（P﹤0.05）；聯(lián)合組TNF-α和IL-1β的表達較清開靈組的、黃芪組的表達均低，且差異有顯著性（P﹤0.05）。 ⑤ CD8+細胞數(shù)目僅對照組與模型組有顯著性差異（P﹤0.05），其他各組間比較無明顯差異；與對照組CD4+數(shù)目比較，其他4組與對照組間差異均有顯著性（P﹤0.05）；與模型組對比，清開靈組、黃芪組、聯(lián)合組CD4+數(shù)目均有顯著增加（P﹤0.05），其中聯(lián)合組更為顯著，且聯(lián)合組與清開靈組、黃芪組對比差異有顯著性（P

10、﹤0.05）；聯(lián)合組CD4+/ CD8+與對照組比較差異無顯著性（P﹥0.05），聯(lián)合組、對照組的CD4+/ CD8+與模型組、清開靈組、黃芪組CD4+/ CD8+差異均有顯著性（P﹤0.05），模型組與清開靈組、黃芪組對比差異有顯著性（P﹤0.05）。 結論： ①清開靈注射液和黃芪注射液均可以減輕肺水腫； ②清開靈注射液和黃芪注射液均可改善急性肺損傷的通氣，減緩呼吸窘迫程度； ③清開靈注射液和黃芪注射液