一株單核玉米絲核菌的鑒定及致病力分析.pdf

1、I d e n t i f i c a t i o na n d p a t h o g e n i c1 ● ●●^ ● 一a n a l y s i s o l u n m u c l e a t eR h i z o c t o n i a s p ·T h e s i ss u b m i t t e d t oQ 薌n g d a o A g r i c u l t u r a l U n i v e r s i t

2、 yI nF u l f i l l m e n t o f t h eR e q u i r e m e n tf o r t h e D e g r e e o fM a s t e ．ro f A g r o n o m yL i u Y i n g( D e p a r t m e n t o f A g r o n o m y )S u p e n r i s o r ：’i B a qc l u s o r ：LB a o

3、d n r V l lZ h o uS h a n y u eQ i n g d a o ．C h i n aJ u n e ，2 0 1 2青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士論文 摘要摘要近年來玉米紋枯痛為害迅速上升，已經(jīng)成為制約玉米持續(xù)增產(chǎn)的主要病害因素之一，因此對玉米紋枯病的研究倍受重視。截至目前對該病病原茵只有多核和雙核絲核菌的研究報(bào)道，尚未有單核絲核茵的研究報(bào)道。本研究中分離到了一株單核絲核菌菌株，對其進(jìn)行了形態(tài)學(xué)及分子生物學(xué)鑒定、生物學(xué)特&#

4、183;陛、致病力測定和其致病力的影響因素的研究。從山東濟(jì)寧地區(qū)采集的玉米紋枯病標(biāo)本中分離得到一株類似絲核茵菌株，觀察其茵落形態(tài)和茵絲特征，符合絲核茵的典型特征。細(xì)胞核熒光染色結(jié)果表明該菌株每個(gè)細(xì)胞內(nèi)只有一個(gè)細(xì)胞核。P C R 擴(kuò)增該菌株的r D N A - I T S 、測序，并對序列進(jìn)行B L A S T 分析，發(fā)現(xiàn)與單核絲核茵與雙核絲核茵Y R 2 7 0 ( C e r a t o b a s i d i u m s p ．A

5、G ．B 幻的序列一致性達(dá)到了9 9 ％?；贙 i m u r a 2 ．P a r a m e t e r 距離模式計(jì)算遺傳距離，兩者的遺傳距離為0 ．0 0 2 ；采用最大簡約法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹，發(fā)現(xiàn)兩者屬于同一分支，自展值支持率達(dá)到1 0 0 ％。結(jié)合形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)兩方面鑒定該菌株為單核絲核茵。對單核絲核菌進(jìn)行生物學(xué)特性分析，明確了該菌株最適生長條件：生長最適溫度為2 8 ℃，最適p H 值為7 ．O ，最適碳、氮源為淀粉和酪

6、氨酸。以不同抗性玉米品種為寄主進(jìn)行苗期接種測定病原茵的致病性，發(fā)現(xiàn)該菌株在抗病、中感品種上引起接種部位褪綠；高感品種接種部位形成典型病斑，說明該單核菌株具有弱致病力。采用高感品種川單4 1 8 為寄主，對單核、雙核和多核絲核茵進(jìn)行致病力測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同菌株間致病力存在顯著差異。對致病力具有顯著差異的單核、雙核和多核絲核茵進(jìn)行生長速率測定并與致病力進(jìn)行相關(guān)性分析，其相關(guān)系數(shù)為0 ．5 8 6 5 ，二者中等強(qiáng)度正相關(guān)。對上述供試茵株進(jìn)行

7、胞壁降解酶和毒素活性測定并分析其與致病力的相關(guān)性。結(jié)果顯示聚甲基多聚半乳糖醛酸酶( P M G ) 、多聚半乳糖醛酸酶( P G ) 和纖維素酶( C x ) 三種胞壁降解酶活性與致病力的相關(guān)系數(shù)分別為0 ．8 2 1 0 、0 ．7 3 1 4和o ．8 4 9 7 ；種子萌發(fā)抑制率、胚根抑制率和粗毒素接種形成的病斑長度與致病力的相關(guān)系數(shù)分別為0 ．9 2 5 7 、0 ．9 6 9 0 和0 ．8 4 2 6 ，說明胞壁降解酶和毒素