雌激素對(duì)缺氧-復(fù)氧心肌核轉(zhuǎn)錄因子(NF-κB)及鈣離子的影響研究.pdf

1、雌激素對(duì)心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷具有保護(hù)作用，但其確切機(jī)制尚未完全闡明。引起心肌細(xì)胞損傷的眾多因素中，鈣超載的發(fā)生和NF—κB的活化是心肌缺血/灌注損傷發(fā)生的重要因素。缺氧/復(fù)氧損傷中NF—κB被激活，其是否與鈣超載的發(fā)生有關(guān)系仍未知。本研究主要探討雌激素對(duì)心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧中NF—κB及鈣離子的影響及NF—κB和鈣離子在缺氧/復(fù)氧中相關(guān)性的研究。 本研究建立乳鼠心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷模型，以噻唑蘭和流式細(xì)胞儀測(cè)細(xì)胞凋亡率及乳酸脫

2、氫酶，肌酸激酶，丙二醛等生化指標(biāo)作為鑒定模型是否成功的指標(biāo)，以免疫熒光技術(shù)檢測(cè)鈣離子濃度，蛋白質(zhì)印跡定量分析NF—κB p65蛋白，觀察二者在損傷過程中的變化及雌激素的作用。通過流式細(xì)胞儀技術(shù)和免疫組化手段分別測(cè)定不同時(shí)間缺氧/復(fù)氧損傷的鈣離子和NF—κB p65蛋白表達(dá)量，通過Pearson相關(guān)性分析確定二者相關(guān)性。選取同一復(fù)氧時(shí)間，予鈣離子抑制劑尼福地平與吡咯烷二硫基甲酸鹽預(yù)處理后，激光共聚焦觀察鈣離子和NF—κB p65蛋白。