抑制Transgelin基因預(yù)防低氧性肺動(dòng)脈高壓的研究.pdf

1、背景和目的:
　　低氧性肺動(dòng)脈高壓是呼吸系統(tǒng)的常見疾病，目前缺乏理想的治療手段，患者預(yù)后普遍較差。低氧性肺血管收縮和肺血管重塑是低氧性肺動(dòng)脈高壓發(fā)病機(jī)制中的兩個(gè)主要環(huán)節(jié)。肺血管收縮出現(xiàn)在缺氧早期，是一個(gè)急性可逆的過程;慢性缺氧則導(dǎo)致難以逆轉(zhuǎn)的肺血管重塑的發(fā)生。肺血管重塑在低氧性肺動(dòng)脈高壓的發(fā)病機(jī)制中起了十分重要的作用，是目前研究的熱點(diǎn)，其主要表現(xiàn)為肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的異常增殖和遷移所致的肺小動(dòng)脈壁中層增厚及遠(yuǎn)端無肌細(xì)動(dòng)脈的肌化。體外

2、研究顯示，低氧通過上調(diào)Transgelin的表達(dá)，促進(jìn)肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的異常增殖和遷移，從而促進(jìn)肺血管重塑的發(fā)生。
　　Transgelin是一種肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白，也是鈣調(diào)節(jié)蛋白家族成員之一。人類的Transgelin基因定位于11q23.2，基因全長5.4kb，由5個(gè)外顯子和4個(gè)內(nèi)含子組成，mRNA全長為1556bp，蛋白分子量為22kD。Transgelin在各物種間廣泛表達(dá)，且序列在不同的種屬間具有高度的保守性。在人體的許多

3、組織中均可檢測到Transgelin，其中以平滑肌組織中的含量最高。目前對于Transgelin的功能并不十分清楚，有研究表明其在前列腺癌、乳腺癌和結(jié)腸癌的發(fā)生中可能具有抑癌基因的作用，一些研究表明低氧處理后Transgelin的表達(dá)水平明顯增高，且當(dāng)采用siRNA的方法干擾Transgelin的表達(dá)后，低氧誘導(dǎo)肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的遷移作用明顯降低。這提示Transgelin在低氧下肺血管重塑的發(fā)生中可能起了重要的作用。
　　基于以

4、上分析，我們推測局部抑制Transgelin基因的表達(dá)能有效的抑制肺血管重塑，具有治療低氧性肺動(dòng)脈高壓的潛力。本研究以慢病毒為載體，局部抑制Transgelin基因，觀察其抑制肺血管重塑及緩解肺動(dòng)脈高壓的作用，以期為低氧性肺動(dòng)脈高壓的臨床治療提供理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:
　　構(gòu)建Transgelin shRNA慢病毒載體，將Transgelin shRNA慢病毒與對照組慢病毒以氣道內(nèi)滴注的方式感染SD大鼠，同時(shí)設(shè)立常

5、氧對照組。1周后將大鼠分別常氧(21％ O2)及低氧(10％ O2)環(huán)境下飼養(yǎng)，3周后采用右室導(dǎo)管法檢測各組大鼠右心室收縮壓(RVSP)、采用天平稱重法檢測右心室肥厚指數(shù)(RVHI)、以及采用HE染色及免疫組化的方法觀察肺血管重塑指標(biāo)——肺細(xì)小動(dòng)脈管壁面積/管總面積(WA％)、肺細(xì)小動(dòng)脈管壁厚度(WT％)、肺無肌型小動(dòng)脈的肌化程度。
　　結(jié)果:
　　(1)低氧+對照慢病毒轉(zhuǎn)染組大鼠的RVSP、RVHI、肺血管重塑指標(biāo)WT％、

6、WA％和肺無肌型動(dòng)脈的肌化程度均明顯高于常氧對照組(P＜0.05)。
　　(2)低氧+Transgelin shRNA慢病毒轉(zhuǎn)染組大鼠的RVSP、RVHI、肺血管重塑指標(biāo)WT％、WA％和肺無肌型動(dòng)脈的肌化程度均明顯低于低氧+對照慢病毒轉(zhuǎn)染組(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　本研究結(jié)果表明:以慢病毒為載體，通過氣道內(nèi)滴注的方式將TransgelinshRNA導(dǎo)入大鼠肺組織，可以在肺組織局部下調(diào)Transgelin基因的