肝素抑制低氧性肺動(dòng)脈高壓機(jī)制的研究.pdf

1、肝素做為抗凝藥物在臨床應(yīng)用已有50余年。除了抗凝作用，肝素還有許多其他生物學(xué)作用，例如調(diào)節(jié)酶類代謝，控制胞外基質(zhì)中細(xì)胞與多種蛋白的結(jié)合，結(jié)合細(xì)胞生長因子等，最近研究發(fā)現(xiàn)肝素能抑制血管平滑肌細(xì)胞(smooth musclecell．SMC)的增殖。 細(xì)胞的增殖受多種細(xì)胞周期調(diào)節(jié)因子調(diào)節(jié)，P27 是細(xì)胞周期依賴性蛋白激酶抑制因子(cyclin-dependent kinase inhibitor，CKI)的一種，．通過抑制周期素依賴

2、性激酶一周期素復(fù)合體(Cdk-Cyclin)的活性來調(diào)控細(xì)胞周期的進(jìn)程，是G<,1>/S期限制點(diǎn)的重要調(diào)控分子。 低氧性肺動(dòng)脈高壓(hypoxia-induced pulmonary hypertension，HPH)的重要病理特征是肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(pulmonary artery smooth muscle cell，PASMC)的增生和肥大。Thompson，Khoury等通過離體和在體實(shí)驗(yàn)研究觀察到肝素可以抑制PASMC

3、的增殖，從而降低HPH的程度，但其機(jī)制至今未明。我們假設(shè)細(xì)胞周期負(fù)調(diào)控因子P27參與了此過程，本實(shí)驗(yàn)將就此進(jìn)行初步研究。 材料與方法 一、試驗(yàn)動(dòng)物 24只大鼠隨機(jī)分為三組，對(duì)照組(A組，n=8)，低氧組(B組，n=8)，低氧并肝素干預(yù)組(C組，n=8)。將B、C兩組置于常壓低氧艙內(nèi)，每天連續(xù)低氧8h[氧濃度(10±0.5)％]，連續(xù)2周，C組在每天低氧開始前和結(jié)束后分別腹腔注射肝素一次(300u／kg)，A、B兩

4、組在相應(yīng)時(shí)間腹腔注射生理鹽水0.4ml，3組動(dòng)物飼養(yǎng)及飲食條件相同。 二、右心室收縮壓測定(rignt ventricular systolic pressure．RVSP)低氧兩周后，采用右心導(dǎo)管法，測定RVSP代替肺動(dòng)脈壓。 三、肺組織標(biāo)本的取材與制備測定RVSP后，打開胸腔，取一側(cè)肺葉用于免疫組織化學(xué)法檢測，取另一側(cè)肺葉，用于RT-PCR檢測。免疫組化結(jié)果用計(jì)算機(jī)進(jìn)行灰度掃描分析，RT-PCR結(jié)果用目的片斷與內(nèi)參條

5、帶的吸光度之比值表示。 四、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，以P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果 一、右心室收縮壓(RVSP)低氧兩周后，右心導(dǎo)管法測定RVSP。運(yùn)用成組設(shè)計(jì)資料樣本均數(shù)比較的q檢驗(yàn)進(jìn)行組問比較，B組高于A組(P<0.01)，B組高于C組(P<0.01)，c組高于A組(p<0.01)。 二、P27免疫組化結(jié)果灰度值比較：B組高于A組(p<0.01)，A組高于