NF-κB在癲癇發(fā)病機(jī)制中的作用.pdf

1、目的:①獲得單一、純化的海馬神經(jīng)元;②證實戊四氮可活化體外培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元;③海馬神經(jīng)元活化產(chǎn)物的制備;④觀察神經(jīng)元活化產(chǎn)物的作用以尋求NF-κB活化在癲癇發(fā)病機(jī)制中的作用.⑤觀察托吡酯對NF-κ B活化的作用.方法:第一部分:用無血清培養(yǎng)基和細(xì)胞有絲分裂抑制劑等進(jìn)行體外培養(yǎng)及純化海馬神經(jīng)元,給予戊四氮(pentyleneterazol,PTZ)刺激神經(jīng)元,觀察NF-κ B表達(dá)的變化,以NF-κ B/p65核移位作為神經(jīng)元活化標(biāo)志.第二

2、部分:觀察托吡酯干預(yù)下海馬神經(jīng)元被戊四氮活化過程中N F-κB的免疫細(xì)胞化學(xué)反應(yīng)的變化.第三部分:海馬神經(jīng)元活化產(chǎn)物注射入大鼠的側(cè)腦室,觀察注射后行為、腦電圖及大腦皮層、海馬GABA(A)受體的免疫組織化學(xué)反應(yīng)的變化.結(jié)論:①在無血清培養(yǎng)基等培養(yǎng)技術(shù)參與下培養(yǎng)海馬神經(jīng)元可獲得較單一神經(jīng)元(純度>90％).②戊四氮可活化體外培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元.③托吡酯可抑制N F-κ B活化.④神經(jīng)元活化產(chǎn)物可產(chǎn)生行為學(xué)、腦電圖改變,GABA(A)受體表達(dá)