2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、毛果楊轉(zhuǎn)錄因子中發(fā)現(xiàn)了一個DREB亞族PtrDREB28基因,通過其表達研究發(fā)現(xiàn)其可能與植物逆境脅迫及次生壁的形成有關(guān)。
  文章首先對毛果楊DREB亞族進行了生物信息學分析。鑒定出毛果楊DREB亞族75個基因。DREB亞族基因進行基于序列的系統(tǒng)發(fā)生樹的研究,分析得出DREB亞族可分為A-1到A-6六個亞群。DREB亞族基因進行了染色體定位,結(jié)果得出毛果楊DREB家族串聯(lián)復制和并列復制占毛果楊DREB亞族蛋白編碼基因的56%(42

2、/75)。DREB亞族基因進行了基因結(jié)構(gòu)分析,毛果楊DREB亞族基因結(jié)構(gòu)保守,除個別基因存在內(nèi)含子外,其余基因都沒有內(nèi)含子結(jié)構(gòu)。DREB亞族基因進行了motif分析,在基因我們得研究中,motif3,為β-折疊1,motif1指β折疊2和3,motif2為α-螺旋,他存在于每一個毛果楊DREB亞族成員中。DREB亞族基因進行了EST電子表達分析,結(jié)果表明有16個基因有較高的轉(zhuǎn)錄表達累積次數(shù)。DREB亞族基因在成熟的葉、嫩葉、根、節(jié)間和莖

3、節(jié)進行了基因芯片表達分析,成熟的葉片中PtrDREB13,15、33、51和53為上調(diào)表達;嫩葉中PtrDREB13、27、28、67和69為上調(diào)表達;節(jié)間PtrDREB20、30、49、70和74為上調(diào)表達;莖節(jié)處PtrDREB28、73和74為上調(diào)表達;根中PtrDREB7、11和18為上調(diào)表達。DREB亞族基因中挑選15個基因進行非生物脅迫分析,除PtrDREB30基因沒有表達外,其余基因均有上調(diào)表達,結(jié)果顯示這些基因能夠被逆境脅

4、迫誘導表達。
  其次,本實驗選取PtrDREB28進行克隆,構(gòu)建35S-PtrDREB28-GFP載體,利用基因槍技術(shù)瞬時轉(zhuǎn)化洋蔥表皮進行亞細胞定位,結(jié)果顯示PtrDREB28基因定位在細胞核中。PtrDREB28基因啟動子克隆及順式作用元件分析,結(jié)果識別9個順式作用元件,其中A-box、Box4、TCT-motif原件為光調(diào)控元件、BoxⅢ為蛋白結(jié)合位點、Box-W1為真菌調(diào)控元件、Skn-1-motif為胚乳特異性表達啟動子

5、、CCGTCC-box為分生組織特異性激活元件、CAAT-box和TATA-box為核心啟動子元件。再次,構(gòu)建PtrDREB28基因過表達和抑制表達載體,遺傳轉(zhuǎn)化大青楊,獲得PtrDREB28過表達轉(zhuǎn)基因株系15個株系和抑制表達轉(zhuǎn)基因株系2個株系。
  最后,過表達轉(zhuǎn)基因大青楊和野生型大青楊在4℃24h,42℃8h的非生物脅迫條件下,野生型葉片受損程度較大,轉(zhuǎn)基因株系POD和SOD活性較強,MDA含量較低。80mM Nacl脅迫一

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