納塔爾鏈霉菌（Streptomyces natalensis）產(chǎn)納他霉素高產(chǎn)菌株的選育.pdf

1、納他霉素(Natamycin)為二十六元多烯大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，一種高效、廣譜、安全的抗真菌生物食品防腐劑，主要由納塔爾鏈霉菌(Streptomyces natalensis)、恰塔努加鏈霉菌(Streptomyces chatanoogensis)和褐黃孢鏈霉菌(Streptomycesgilvosporeus)等產(chǎn)生菌經(jīng)發(fā)酵過程產(chǎn)生。為了提高納他霉素的產(chǎn)量，本論文對納他霉素產(chǎn)生菌納塔爾鏈霉菌(Streptomyces natalens

2、is)HDMNTE-01的培養(yǎng)方式、發(fā)酵液中納他霉素的檢測方法及納他霉素高產(chǎn)菌株的選育進行了系統(tǒng)的研究。 首先對管碟法測定發(fā)酵液中納他霉素的各項參數(shù)進行了研究。結(jié)果表明，將檢測菌釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)W23培養(yǎng)至107CFU／mL，以10％的量加入到上層培養(yǎng)基中制各雙層檢測平板，在牛津杯中加入70μL經(jīng)甲醇提取的檢測液，培養(yǎng)24h后觀察結(jié)果所得數(shù)據(jù)符合要求。 比較6種不同的斜面培養(yǎng)基

3、和4種不同的種子培養(yǎng)基，選擇出培養(yǎng)和保藏HDMNTE-01的最佳培養(yǎng)基配方。孢子斜面培養(yǎng)基(g／L)：葡萄糖10、淀粉10、黃豆餅粉10、麥芽抽提物3、酵母抽提物3、MgSO4·7H2O 1、K2HPO4 0.5、NaCl 2、CaCO3 3、瓊脂20；種子培養(yǎng)基配方(g／L)：淀粉10、黃豆餅粉10、蛋白胨6、玉米漿6、葡萄糖10、MgSO4·7H2O 1、K2HPO4 0.5、NaCl 2、CaCO35。 研究了HDMNTE

4、-01搖瓶發(fā)酵的種齡、接種量、裝液量、發(fā)酵培養(yǎng)基初始pH、溫度、轉(zhuǎn)數(shù)等對發(fā)酵的影響，得到最佳發(fā)酵條件為：接種量6％、裝液量為25mL/50mL，發(fā)酵液初始pH值為7.0，發(fā)酵96h為代謝產(chǎn)物最佳收獲時間；搖床溫度為28℃；轉(zhuǎn)數(shù)為220r／min。 根據(jù)納他霉素的生物合成途徑和代謝調(diào)節(jié)機理，對納他霉素產(chǎn)生菌納塔爾鏈霉菌HDMNTE-01進行誘變，選育高產(chǎn)菌株。以瓊脂塊法篩選到的103號菌為出發(fā)菌株，先后分別經(jīng)紫外線、DES、吖啶橙