納他霉素高產(chǎn)菌株的選育及發(fā)酵工藝的優(yōu)化.pdf

1、納他霉素是一種高效、廣譜的抗真菌抗生素，能有效地抑制酵母菌和霉菌的生長，在醫(yī)療、食品等方面具有良好的應(yīng)用前景。本論文通過對納他霉素系列濃度全波長的掃描分析，選擇250nm作為納他霉素的檢測波長，擴(kuò)大納他霉素檢測的線性范圍，提高了HPLC的檢測準(zhǔn)確性；利用重復(fù)誘變的方法對納他霉素產(chǎn)生菌進(jìn)行誘變選育，得到了高產(chǎn)菌株P(guān)M4-18，同時對PM4-18菌種進(jìn)行搖瓶發(fā)酵工藝優(yōu)化，通過對50L發(fā)酵罐代謝過程的研究，確定了發(fā)酵罐的培養(yǎng)條件，通過前期增加

2、碳源和中后期補(bǔ)入碳源來提高了納他霉素的發(fā)酵水平。
　　 對納他霉素的HPLC檢測方法-USP方法進(jìn)行優(yōu)化，通過比較在303nm和250nm波長下的檢測結(jié)果分析，在250nm吸收波長下，納他霉素在5-2000μg/ml的之間有很強(qiáng)的線性關(guān)系，并且回收率達(dá)到101％，檢測方法更加準(zhǔn)確。
　　 根據(jù)納他霉素的生物合成途徑和代謝調(diào)節(jié)機(jī)理，利用NTG誘變劑，對納他霉素菌株P(guān)M2-5進(jìn)行誘變處理，經(jīng)初篩和復(fù)篩得到高產(chǎn)菌株P(guān)M3-7，

3、搖瓶發(fā)酵單位比出發(fā)菌種提高了30％，在此基礎(chǔ)上再次利用NTG誘變劑和淺藍(lán)霉素的抗性選擇壓力，得到了高產(chǎn)突變株P(guān)M4-18，發(fā)酵單位比出發(fā)菌株P(guān)M2-5提高了67％。
　　 通過納他霉素高產(chǎn)菌株P(guān)M4-18的研究，考察斜面培養(yǎng)時間、斜面冷藏時間、斜面?zhèn)鞔€(wěn)定性，確定了種子的種齡和級數(shù)；通過培養(yǎng)基的單一試驗和正交試驗方法優(yōu)化發(fā)酵培養(yǎng)基，篩選得到最佳的培養(yǎng)基配方，確定了搖瓶的培養(yǎng)溫度、PH、接種量、裝液量，使納他霉素優(yōu)化后工藝水平比原