恰塔努加鏈霉菌中納他霉素轉運網(wǎng)絡及其調控機制研究.pdf

1、鏈霉菌能產生大量具有重要醫(yī)療和商業(yè)價值的天然產物，其中包括了大部分抗生素。抗生素對于產生菌普遍具有自身毒性，鏈霉菌為抵抗所合成藥物對自身的傷害，進化出多種自身耐藥機制，藥物外排是其中一種十分重要的機制。近年來抗生素的合成、調控、后修飾機制都得到了深入解析，而抗生素轉運機制的研究仍然處于起步階段。本文以一株自行篩選的納他霉素高產工業(yè)菌L10為研究對象，深入解析了納他霉素及其合成前體的轉運機制和相關調控應答機制。
　　首先，論文證實納

2、他霉素合成基因簇內的兩個Ⅲ型ABC轉運蛋白ScnA和ScnB參與了納他霉素轉運，且ScnA和ScnB能夠分別形成同源二聚體行使納他霉素轉運功能。除ScnA和ScnB外，我們利用表達譜芯片篩選出Mfs1、NepⅠ/NepⅡ這2組轉運蛋白，其中Mfs1編碼了主要協(xié)助轉運蛋白超家族蛋白;NepⅠ/NepⅡ共同編碼了Ⅰ型ABC轉運蛋白。實驗結果表明:Mfs1與NepⅠ/Ⅱ能夠與ScnA、ScnB協(xié)同作用，共同構成納他霉素高效轉運網(wǎng)絡。進一步研究

3、發(fā)現(xiàn)，ScnA/B、Mfs1還能夠識別和轉運納他霉素合成直接前體4.5-脫環(huán)氧納他霉素。另外，進化分析結果表明存在于抗生素合成基因簇外基因編碼的轉運蛋白可能是廣泛存在的鏈霉菌中的一種自身耐藥機制。
　　其次，論文系統(tǒng)研究了納他霉素轉運網(wǎng)絡的調控機制，研究結果表明，scnA/B受途徑特異性調控因子ScnRⅡ正調控，mfs1受TetR家族調控因子Mfo1負調控。當細胞內出現(xiàn)納他霉素或其前體累積時， Mfo1會應答這種累積，啟動Mfs1