尿酸減輕魚藤酮對PC12細胞損傷作用及機制的研究.pdf

1、第一部分，尿酸減輕魚藤酮對PC12細胞的損傷作用
　　 目的：評價尿酸減輕魚藤酮誘導(dǎo)PC12細胞的損傷作用。
　　 方法：采用PC12細胞制作魚藤酮損傷的帕金森病細胞模型，分為對照組、魚藤酮組、尿酸組和尿酸+魚藤酮組。藥物作用24h后，采用比色法檢測細胞外乳酸脫氫酶(LDH)活力；光學(xué)顯微鏡下觀察細胞形態(tài)；Hoechst33342染色檢測PC12細胞的凋亡率；AnnexinV-PI雙染色檢測凋亡細胞。
　　 結(jié)果

2、：0.1-5μmol/L魚藤酮對PC12細胞作用24h后LDH釋放顯著增加(267.33±44.79U/Lvs189.75±37.50U/L,303.04±34.01U/Lvs189.75±37.50U/L,380.25±28.38U/Lvs189.75±37.50U/L,436.52±29.32U/Lvs189.75±37.50U/L,500.19±32.36U/Lvs189.75±37.50U/L,563.35±42.33U/Lvs

3、189.75±37.50U/L,P＜0.05):1μmol/L魚藤酮作用于PC12細胞24h后，與對照組比較，Hoechst33342染色及AnnexinV-PI染色細胞凋亡率細胞凋亡率顯著增多(P＜0.05),50-400μmol/L尿酸加入PC12細胞24h后，與對照組相比各項指標(biāo)均無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。50-400μmol/L尿酸+1μmol/L魚藤酮組與1μmol/L魚藤酮組相比較，LDH釋放量顯著降低(367.02±1

4、5.71U/Lvs464.43±20.26U/L,329.56±15.79U/Lvs464.43±20.26U/L,299.65±26.37U/Lvs464.43±20.26U/L,284.70±21.18U/Lvs464.43±20.26U/L,P＜0.05)，200μmol/L尿酸+1μmol/L魚藤酮組與1μmol/L魚藤酮組相比較Hoechst33342染色及AnnexinV-PI染色細胞凋亡率細胞凋亡率顯著減少(P＜0.05)

5、。
　　 結(jié)論：尿酸對魚藤酮誘導(dǎo)PC12細胞的損傷具有保護作用。
　　 第二部分，尿酸減輕魚藤酮對PC12細胞損傷作用的機制研究
　　 目的：探討尿酸減輕魚藤酮介導(dǎo)的PC12細胞損傷作用的機制。
　　 方法：應(yīng)用魚藤酮建立PC12細胞損傷模型，分為對照組（DMSO組）、魚藤酮（1μmol/L）組、尿酸（200μmol/L）組和尿酸（200μmol/L）+魚藤酮（1μmol/L）組。魚藤酮作用24h后，比色

6、法測定超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽(GSH)的活性變化；流式細胞儀檢測線粒體膜電位變化；蛋白印跡法檢測從線粒體釋放到胞漿中的細胞色素c的水平。
　　 結(jié)果：1μmol/L魚藤酮作用于PC12細胞24h小時后，與對照組相比，SOD活性顯著下降(10.40±0.76U/Lvs20.62±0.37U/L，P＜0.05)，GSH含量顯著降低(1.86±0.71μmol/gprovs7.67±1.38μmol/gpro，P＜0.05

7、)，線粒體的膜電位下降(0.66±0.03％vs1±0.06%，P＜0.05)，線粒體內(nèi)釋放到胞漿中細胞色素c的水平增高(0.74±0.14vs0.11±0.11，P＜0.05)。200μmol/L尿酸組與對照組相比各項指標(biāo)均無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)；200μmol/L尿酸+1μmol/L魚藤酮組與1μmol/L魚藤酮組相比較，SOD活性升高(17.40±0.28U/Lvs10.40±0.76U/L，P＜0.05)，GSH活性水平增