蜂蜜中林可霉素殘留檢測方法的研究.pdf

1、林可霉素屬于林可胺類抗生素,能有效的抑制革蘭氏陽性菌,廣泛應(yīng)用于蜂業(yè)生產(chǎn)中,對蜜蜂美洲幼蟲腐臭病(AFB)有很好的防治效果。為保障消費者安全,控制林可霉素在蜂產(chǎn)品中的殘留,迫切需要建立一種靈敏、高效的林可霉素藥物殘留檢測技術(shù)?；诖?本文建立了可用于蜂蜜中林可霉素殘留檢測的高效液相色譜紫外檢測(HPLC/UV)法和高效液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜(LC-ESI-MS/MS)法。 1.蜂蜜中林可霉素殘留HPLC/UV檢測方法的建立建立

2、了林可霉素在蜂蜜中殘留檢測的高效液相色譜紫外檢測(HPLC/UV)法。樣品經(jīng)提取凈化、反相液相色譜分離,用二極管陣列檢測器進行檢測。檢測波長為204nm,流動相為硼砂緩沖液(pH5.0)：甲醇：乙腈=70:26:4(V/V),流速1.0mL/mim進樣量為20μL。用AgilentHypersil BDS-C18250mm×4.6mm色譜柱分離檢測,在優(yōu)化的色譜分離條件下,林可霉素色譜行為良好,藥物的保留時間在6.9min。在1.0～2

3、0μg·mL-1線性范圍內(nèi),峰面積與添加濃度的線性關(guān)系良好(r2>0.999 93)。在2.5、5.0、10.0μg·g-1 3個添加水平,林可霉素的平均回收率范圍為93.02±1.22％,日內(nèi)測定結(jié)果的相對標準偏差小于1.58％,日間測定結(jié)果的相對標準偏差小于1.49％,最低檢測限75ng·g-1。 2.蜂蜜中林可霉素殘留LC-ESI-MS/MS檢測方法的建立建立了蜂蜜中林可霉素殘留的高效液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜(HPLC-E

4、SI-MS/MS)檢測方法。樣品經(jīng)固相萃取提取凈化、液相色譜分離后進行質(zhì)譜分析,在多反應(yīng)監(jiān)測模式(MRM)下進行特征母離子、子離子對信號采集。根據(jù)保留時間、母離子和兩個特征子離子信息行定性分析,以離子峰度最強的基峰離子m/z126進行定量。在1.0～20ng·mL-1線性范圍內(nèi),峰強度與添加濃度的線性關(guān)系良好(r2>0.999 6)。在2.5、5.0、10.0ng·g-1 3個添加水平,林可霉素的平均回收率范圍為95.1±3.3％,日內(nèi)