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1、華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文shRNA干擾HIF1α對人宮頸癌細(xì)胞黏附分子表達(dá)的影響姓名:董蘭蘭申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):腫瘤科指導(dǎo)教師:袁響林20080501華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文1shRNA干擾干擾HIF1α對人宮頸癌細(xì)胞黏附分子表達(dá)的影響對人宮頸癌細(xì)胞黏附分子表達(dá)的影響華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院腫瘤科研究生:董蘭蘭導(dǎo)師:袁響林教授摘要目的目的在細(xì)胞和移植瘤水平研究shRNA干擾低氧誘導(dǎo)因子1α(hypoxiainducible
2、fact1HIF1α)對人宮頸腺癌HeLa細(xì)胞中黏附分子CD44v6及上皮型鈣粘素(Ecadherin)表達(dá)的影響,初步探討其可能機(jī)制。方法方法將人宮頸癌Hela細(xì)胞株(記為H0細(xì)胞)、轉(zhuǎn)染pGenesil1空白質(zhì)粒的HeLa細(xì)胞株(記為H1細(xì)胞)及轉(zhuǎn)染HIF1αshRNA質(zhì)粒的HeLa細(xì)胞株(記為H2細(xì)胞)分別行常氧培養(yǎng)及1%O2低氧培養(yǎng),應(yīng)用Westernblotting檢測每組HeLa細(xì)胞中HIF1α、CD44v6、Ecadher
3、in及β連接素(βcatenin)在細(xì)胞水平的表達(dá)情況。應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測HIF1α、CD44v6、Ecadherin及βcatenin在上述3種HeLa細(xì)胞裸鼠移植瘤模型組織水平的表達(dá)情況。結(jié)果結(jié)果Westernblotting分析顯示,H0和H1細(xì)胞低氧組檢測到HIF–1α、βcatenin、CD44v6蛋白呈強陽性而Ecadherin表達(dá)減弱,常氧狀態(tài)下H0、H1和H2組及低氧下H2組HIF1α未表達(dá),Ecadherin表達(dá)呈
4、陽性。免疫組化分析發(fā)現(xiàn)H0及H1組移植瘤中HIF1α、Ecadherin、βcatenin及CD44v6的表達(dá)分別為0.6510.057、0.1980.015、0.4650.061及0.6870.102,0.6710.069、0.2010.020、0.4520.038及0.7010.071,H2組移植瘤中分別為0.1940.023、0.5480.045、0.4210.052及0.1870.057,H2組與H0和H1組間HIF1α、Eca
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