局部晚期宮頸癌細(xì)胞中HIF-1α、VEGF的表達(dá)情況及其與預(yù)后的關(guān)系.pdf

1、背景：
　　宮頸癌是嚴(yán)重威脅女性健康的一種惡性腫瘤，發(fā)病率占我國(guó)婦女生殖系統(tǒng)惡性腫瘤的首位。每年全球大概有50萬(wàn)新癌患者，占新發(fā)癌癥的5％，其中大多數(shù)的新發(fā)病例產(chǎn)生在發(fā)展中國(guó)家，每年約有20多萬(wàn)女性死于癌，我國(guó)每年約有新發(fā)病例13.15萬(wàn)，占世界子宮頸癌新發(fā)病例總數(shù)的28.8%，宮頸癌好發(fā)年齡在35-40和60-65兩個(gè)段，平均發(fā)病年齡為50.4，研究顯示其發(fā)病率在這些地區(qū)有上升趨勢(shì)，患者逐漸低齡化。
　　子宮頸位于盆腔中央

2、，解剖位置較深、解剖結(jié)構(gòu)相對(duì)復(fù)雜，并且腫瘤的惡性程度高，早期宮頸癌大多無(wú)明顯體征、癥狀，容易被忽略，一旦出現(xiàn)陰道流血、疼痛等典型癥狀時(shí)，腫瘤往往已發(fā)展到局部晚期的程度。目前臨床上治療宮頸癌的主要方式為手術(shù)治療及同步放化療，宮頸癌細(xì)胞對(duì)放射線及化療較為敏感，因此放射治療及化療是宮頸癌有效的治療手段，
　　并可取得較好的療效。已有相關(guān)研究表明，早期宮頸癌（Ⅰ期）治療以單純手術(shù)或單純放療為主，二者療效良好，有效率、并發(fā)癥幾率、死亡率相當(dāng)

3、，5年生存率超90%。局部晚期宮頸癌（Ⅱ期及以上）患者因存在腫瘤負(fù)荷大、淋巴結(jié)擴(kuò)散、分化程度低等轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)的高危因素，若單純進(jìn)行放療或手術(shù)治療無(wú)法取得較好的療效，患者整體生存率不高。國(guó)內(nèi)外許多關(guān)于宮頸癌單純放療與同步放化療療效對(duì)比的隨機(jī)分組臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示，同步放化療在局控率、生存率、死亡率方面，相比單純放療有明顯的優(yōu)勢(shì)，同期放化療已成為中晚期宮頸癌治療的標(biāo)準(zhǔn)模式。宮頸癌的治療中除了原發(fā)病灶未控，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移也是主要失敗原因之一。據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)

4、報(bào)道，大約4%-11%的初診宮頸癌中已發(fā)現(xiàn)有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，尸檢的轉(zhuǎn)移率更高達(dá)47%。遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的原因有許多，其中新生血管的形成是腫瘤進(jìn)展及轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵性步驟。
　　大多數(shù)人類(lèi)實(shí)體腫瘤微環(huán)境中存在缺氧狀態(tài)，缺氧環(huán)境能夠刺激腫瘤細(xì)胞分泌出多種促血管生成因子，能誘發(fā)局部新血管生成，以改善局部腫瘤細(xì)胞的血液供應(yīng)及能量供給，有利于腫瘤細(xì)胞放射性、化學(xué)性損傷的修復(fù)，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞復(fù)制和轉(zhuǎn)移，對(duì)治療效果造成較大影響。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)缺氧狀態(tài)下激活的核轉(zhuǎn)錄因子

5、：乏氧誘導(dǎo)因子-lα(hypoxia-inducible factor-1 alpha，HIF-1α)是令組織細(xì)胞耐受乏氧、平衡機(jī)體氧耗及雙向調(diào)控細(xì)胞凋亡的重要調(diào)控因子，它參與了大多數(shù)有關(guān)乏氧誘導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)錄。而血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）是HIF-1α下游調(diào)控的重要靶基因之一，當(dāng)惡性腫瘤細(xì)胞群直徑達(dá)到1-2mm時(shí)，腫瘤細(xì)胞群周?chē)?xì)血管的氧有效彌散范圍不能滿(mǎn)足腫瘤快速

6、增殖的需要，HIF-1α通過(guò)上調(diào)VEGF等血管生成因子的表達(dá)，使腫瘤局部新生血管生成增多、加快，達(dá)到改善局部腫瘤細(xì)胞的血液供應(yīng)和營(yíng)養(yǎng)供給， VEGF是內(nèi)皮細(xì)胞特異性的有絲分裂原，作為迄今為止發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)的天然促血管生成因子，其過(guò)度表達(dá)對(duì)于促進(jìn)腫瘤浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移具有重要作用。腫瘤的進(jìn)展及、放化療的抗拒和不良預(yù)后與乏氧誘導(dǎo)因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)的過(guò)度表達(dá)有關(guān)。乏氧誘導(dǎo)因子—1（HIF-1

7、）是在乏氧條件下存在于哺乳動(dòng)物和人體內(nèi)一種核轉(zhuǎn)錄因子，主要由HIF-1α和HIF-1β兩個(gè)亞基組成。HIF-1β對(duì)氧無(wú)反應(yīng)，HIF-1α是唯一的受乏氧調(diào)節(jié)的亞基，它決定HIF-1的活性。當(dāng)細(xì)胞氧濃度降低時(shí)，HIF-1α蛋白水平呈指數(shù)增加，它可以啟動(dòng)多種下游基因（如VEGF、EPO等），通過(guò)調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄的方式，引發(fā)一系列基因表達(dá)的改變，從而調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞適應(yīng)乏氧導(dǎo)致的微環(huán)境的改變，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的增殖和浸潤(rùn)等能力。HIF-1α調(diào)控VEGF表達(dá)

8、升高后使腫瘤血管的生成增加，有利于腫瘤細(xì)胞獲得營(yíng)養(yǎng)，有助于腫瘤細(xì)胞損傷修復(fù)，降低惡性腫瘤細(xì)胞對(duì)放射線的敏感性，在腫瘤的發(fā)展及侵襲、轉(zhuǎn)移等方面發(fā)揮重要的作用。多項(xiàng)研究表明HIF-lα作為一種內(nèi)源性標(biāo)記物能夠較為準(zhǔn)確的反映腫瘤乏氧程度，通過(guò)對(duì)HIF-1α及VEGF在腫瘤細(xì)胞中表達(dá)情況的檢測(cè)，能夠較好地評(píng)估腫瘤細(xì)胞的低氧程度及轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)，進(jìn)一步了解HIF-1α、VEGF與腫瘤預(yù)后的關(guān)系，目前是腫瘤研究的熱門(mén)方向。
　　研究目的：
　

9、　治療前通過(guò)檢測(cè)HIF-1α、VEGF在宮頸癌病人腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)情況，了解二者之間的關(guān)系，分析其與宮頸癌綜合治療療效的相關(guān)性，有助于判斷宮頸癌生物學(xué)行為、惡性程度及預(yù)后，為針對(duì)以HIF-1α、VEGF為目標(biāo)的靶基因治療提供新的思路，同時(shí)提高宮頸癌病人的治療有效率、生存率。
　　研究方法：
　　119例病例均由有的醫(yī)病理活確狀胞癌。采用免疫組化常規(guī)SP法染色檢測(cè)宮頸癌組織中HIF-1α及VEGF的表達(dá)強(qiáng)度。HIF-1α免疫組

10、化染色主要以細(xì)胞核中出現(xiàn)棕黃色顆粒為其陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果顯示HIF-1α陽(yáng)性組86例，HIF-1α陰性組33例；VEGF免疫組化染色以細(xì)胞漿中出現(xiàn)棕黃色顆粒為其陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果顯示VEGF陽(yáng)性組93例，VEGF陰性組26例。
　　兩組患者均接受同期放化療：放射治療使用6MV-X線二維盆腔外照射，前后大野對(duì)穿照射DT30 Gy（每次2 Gy，每周5次，連續(xù)3周，共15次）；后改四野照射DT20 Gy（每次2 Gy，每周5次，連續(xù)2

11、周，共10次），照射范圍不變，僅在全盆腔照射野中央擋3~4 cm寬鉛塊）。當(dāng)盆腔大野照射20 Gy后即開(kāi)始同期采用192 Ir后裝機(jī)行腔內(nèi)放療，A點(diǎn)劑量每次6 Gy，每周1次，總劑量DT36~42 Gy，共照射6~7次，腔內(nèi)照射當(dāng)天不作體外照射。同期化療：放療期間內(nèi)予單藥順鉑40 mg/m2/ Q7d同期化療，每周1次，連用6次。
　　通過(guò)相關(guān)性分析HIF-1α陽(yáng)性表達(dá)與VEGF陽(yáng)性表達(dá)之間的關(guān)系，了解二者之間的調(diào)控關(guān)系。

12、　　對(duì)比HIF-1α陽(yáng)性表達(dá)與陰性表達(dá)組的腫瘤治療有效率、1年生存率、2年生存率。采用SPSS19．0件研究果行理，生存率分析應(yīng)用Kaplan-Meier法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，通過(guò)Logrank檢驗(yàn)對(duì)比生存率，P＜0.05表示具學(xué)意。
　　研究結(jié)果：
　　同期放化療前，通過(guò)免疫組化染色及分組得出：HIF-1α表達(dá)（++）者37例、表達(dá)（+++）者49例，即陽(yáng)性表達(dá)組共86例，陽(yáng)性率占72.3%，陰性率為27.7%；VEGF表達(dá)（++）

13、者40例、表達(dá)（+++）者53例，即陽(yáng)性表達(dá)組共93例，陽(yáng)性率占78.2%，陰性率為21.8%。兩者的陽(yáng)性、陰性組之間對(duì)比差異顯著。
　　結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)：宮頸鱗癌細(xì)胞中HIF-1α陽(yáng)性和VEGF陽(yáng)性表達(dá)程度呈正相關(guān)，(r=0．375，P<0．05)，表明兩者之間存在某種調(diào)控作用。
　　119例癌患者完成放化后4周行近期效定，綜合治療后HIF-1α陽(yáng)性、陰性表達(dá)組的腫瘤治療有效率分別為82.6%（71/86）、93.9

14、%（31/33），兩組對(duì)比差異顯著，P＜0.05。
　　隨訪時(shí)間12個(gè)月，119例患者1年生存率85.7%（102/119）。其中HIF-1α陽(yáng)性表達(dá)組、陰性表達(dá)組患者的1年生存率分82.6%（71/86）、93.9%（31/33）。隨訪時(shí)間24個(gè)月，119例患者2年生存率79.8%（95/119）。其中HIF-1α陽(yáng)性表達(dá)組、陰性表達(dá)組患者的2年生存率分76.7%（66/86）、87.9%（29/33）。
　　結(jié)論：

15、>　　1．乏氧誘導(dǎo)因子HIF-1α及VEGF在局部晚期宮頸鱗癌細(xì)胞中呈現(xiàn)高表達(dá)， HIF-1α及VEGF表達(dá)具有一致性。
　　2．HIF-1α在宮頸鱗癌的表達(dá)與腫瘤治療有效率呈負(fù)相關(guān)，HIF-1α高表達(dá)，腫瘤治療有效率低。乏氧誘導(dǎo)因子HIF-1α的表達(dá)水平與宮頸鱗癌療效有相關(guān)性，檢測(cè)它對(duì)宮頸癌預(yù)后具有重要價(jià)值。
　　3．HIF-1α在宮頸鱗癌的表達(dá)與患者2年生存率成相關(guān)，HIF-1α高表達(dá)，患者年生存率低。乏氧誘導(dǎo)因子HIF