VEGF促進(jìn)模擬不吻合靜脈兔斷肢再植成活的研究.pdf

1、目的：探討VEGF對模擬不吻合靜脈兔斷肢再植模型微血管生成及靜脈血液回流的影響，為臨床治療研究提供依據(jù)。 方法：成年新西蘭大白兔30只，雌雄不拘，沿雙后肢踝關(guān)節(jié)平面離斷，僅保留脛后動(dòng)脈與足背動(dòng)脈，離斷組織除靜脈外重新縫合，制作模擬不吻合靜脈兔斷肢再植模型，隨機(jī)分為VEGF實(shí)驗(yàn)組和生理鹽水對照組，每組15只，分別標(biāo)記左后肢為組織活檢側(cè)，右后肢為觀察肢體成活側(cè)；實(shí)驗(yàn)組和生理鹽水對照組再按術(shù)后放血時(shí)間又各隨機(jī)分為3組，每組5只，放血時(shí)間分為6

2、、9、12天共三個(gè)觀察時(shí)間點(diǎn)。模型制作完成后立即于實(shí)驗(yàn)組離斷平面環(huán)行注入含3μg VEGF的0.9%Nacl溶液0.5ml，對照組同法同量注入0.9%Nacl溶液。分別于術(shù)后6天、9天、12天切取左后肢離斷面組織切片行HE染色觀察微血管形態(tài)及組織愈合變化情況，CD34免疫組織化學(xué)染色測算微血管數(shù)量及管徑，評價(jià)各組中微血管數(shù)量、管徑的差異；右后肢亦同時(shí)停止放血，繼續(xù)喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物5天，進(jìn)行肢體存活大體形態(tài)學(xué)觀察并照相，采用數(shù)碼相機(jī)照相結(jié)合I

3、mage J醫(yī)學(xué)圖像分析軟件計(jì)算皮膚成活率。
　　 結(jié)果：(1)大體標(biāo)本觀察：實(shí)驗(yàn)組及對照組術(shù)后6天停止放血后再植肢體有不同程度壞死，對照組比實(shí)驗(yàn)組范圍大，皮膚成活率低于實(shí)驗(yàn)組，P<0.01，差異有顯著性；術(shù)后9天、12天均無肢體壞死，對照組肢體腫脹比實(shí)驗(yàn)組明顯、傷口愈合明顯延遲。(2) HE染色顯示：術(shù)后6天實(shí)驗(yàn)組以中、小血管生成為主，對照組以小血管為主，術(shù)后9天實(shí)驗(yàn)組以大血管生成為主，對照組以中血管為主，術(shù)后12天實(shí)驗(yàn)組血管

4、開始吻合，管壁開始增厚，可看到瘢痕組織，對照組血管有吻合趨勢，提示實(shí)驗(yàn)組傷口愈合的時(shí)間比對照組明顯提前。(3)免疫組織化學(xué)染色顯示：在不同觀察時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組血管密度均明顯高于對照組(P<0.05)，血管直徑明顯大于對照組(P<0.05)，差異有顯著性，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。組內(nèi)比較均以術(shù)后9天血管密度最高(P<0.05)、血管管徑最大，差異有顯著性(P<0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論：(1)VEGF有促進(jìn)微血管生成、改善模擬不吻