2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、目的:樹突狀細(xì)胞(Dendriticcell,DC)是目前發(fā)現(xiàn)的功能最強(qiáng)的專職性抗原呈遞細(xì)胞(Antigen-presentingCells,APC),是激發(fā)特異性免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)和抗腫瘤免疫的重要載體。以DC為基礎(chǔ)的腫瘤疫苗在部分惡性腫瘤的治療中已顯示出良好的效果。腫瘤多藥耐藥(multidrugresistance,MDR)是臨床腫瘤化療失敗的主要原因之一,大量研究證實(shí)腫瘤的生物治療對(duì)機(jī)體而言更為安全,不像化療、手術(shù)、放射等方法殺

2、傷腫瘤的同時(shí)也大量殺傷了正常細(xì)胞。因此我們?cè)O(shè)想是否能將P-gp作為腫瘤免疫治療的靶點(diǎn),將其高表達(dá)的MDR腫瘤細(xì)胞凍融抗原沖擊致敏DC,誘導(dǎo)產(chǎn)生P-gp特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CytotoxicTlymphocyte,CTL)反應(yīng)?以及產(chǎn)生的特異性CTL反應(yīng)與藥物敏感腫瘤細(xì)胞抗原致敏的DC所誘導(dǎo)的CTL反應(yīng)有何不同?故此,本實(shí)驗(yàn)擬用人乳腺癌P-gp高表達(dá)耐藥細(xì)胞株MCF-7/ADR及其敏感株MCF-7腫瘤凍融抗原沖擊致敏DC,探討其對(duì)殺

3、瘤活性的影響。 方法;采集健康供者骨髓血,用淋巴細(xì)胞分離液分離單個(gè)核細(xì)胞,應(yīng)用重組人粒/單細(xì)胞集落刺激因(rhGM-CSF,1000U/ml)、重組人白介素-4(rhIL-4,500U/ml)和重組人腫瘤壞死因子-a(rhTNF-a,100ng/ml)聯(lián)合培養(yǎng)體系誘導(dǎo)骨髓單個(gè)核細(xì)胞產(chǎn)生DC,再以人乳腺癌P-gp高表達(dá)耐藥細(xì)胞株MCF-7/ADR及其敏感株MCF-7腫瘤凍融抗原沖擊致敏DC,以光學(xué)顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài),流式細(xì)胞儀(F

4、ACS)檢測(cè)細(xì)胞免疫表型,MTT法檢測(cè)DC誘導(dǎo)CTL增殖及體外效應(yīng)細(xì)胞殺傷活性。 結(jié)果;骨髓單個(gè)核細(xì)胞(BMMNC)經(jīng)體外擴(kuò)增培養(yǎng)后,具有典型的樹突狀形態(tài)特征,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表面CD1a、CD83、CD80、CD86、HLA-DR表達(dá)率均較培養(yǎng)前明顯增高(P<0.01),經(jīng)抗原負(fù)載的DC能有效地激發(fā)外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMNC)中CD8+T細(xì)胞增殖(P<0.01)。MCF-7/ADR-DC及MCF-7-DC均可介導(dǎo)針對(duì)靶細(xì)胞

5、MCF-7/ADR和MCF-7的細(xì)胞毒作用,明顯強(qiáng)于未經(jīng)腫瘤抗原致敏的DC組及T細(xì)胞組(P<0.01)。在效靶比為20:1時(shí),MCF-7/ADR-DC+T及MCF-7-DC+T對(duì)靶細(xì)胞MCF-7/ADR殺傷率分別為53.67±2.10%和41.83±1.63%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 結(jié)論;骨髓單個(gè)核細(xì)胞(BMMNC)經(jīng)細(xì)胞因子聯(lián)合培養(yǎng)體系(GM-CSF、IL-4、TNF-a)培養(yǎng)并經(jīng)P-gp高表達(dá)的MDR細(xì)胞株MC

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