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1、【目的】:將殼聚糖和聚己內(nèi)酯二者的優(yōu)點(diǎn)結(jié)合起來制備殼聚糖-聚己內(nèi)酯復(fù)合多孔支架材料,研究其作為軟骨組織工程技術(shù)中軟骨細(xì)胞培養(yǎng)支架的可行性。
【方法】:消化分離1周齡SD大鼠四肢膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞,Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色鑒定軟骨細(xì)胞。取第二代軟骨細(xì)胞接種于自制的殼聚糖-聚己內(nèi)酯復(fù)合多孔支架上培養(yǎng),從光鏡和掃描電鏡觀察軟骨細(xì)胞在支架上的粘附、增殖和細(xì)胞外基質(zhì)的分泌情況。MTT檢測(cè)軟骨細(xì)胞在支架上的增殖情況。軟骨細(xì)胞-支架復(fù)合物HE染
2、色觀察軟骨細(xì)胞在殼聚糖-聚己內(nèi)酯支架中的生長(zhǎng)分布情況。
【結(jié)果】:制備的復(fù)合支架表面呈多孔狀,孔壁為纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),孔隙分布較均勻,孔隙連通性較好。Ⅱ型膠原免疫組化染色呈陽性結(jié)果,說明培養(yǎng)的細(xì)胞具有軟骨細(xì)胞特性。軟骨細(xì)胞能夠在殼聚糖-聚己內(nèi)酯復(fù)合支架上黏附、伸展、增殖和發(fā)揮正常功能,MTT測(cè)得軟骨細(xì)胞在支架中的增殖能力較強(qiáng)。HE染色顯示支架中軟骨細(xì)胞分布較均勻,呈三角形和多角形,細(xì)胞間相互接觸,隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),支架中細(xì)胞增多,
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