CIDEC互作蛋白的篩選與分析.pdf

1、豬肉品質(zhì)是豬的重要經(jīng)濟(jì)性狀，也是豬的性能測定中的一重要指標(biāo)。隨著人們生活水平的提高，豬的肉質(zhì)性狀也從剛開始一味追求瘦肉率到現(xiàn)在更注重肉質(zhì)品質(zhì)。肌內(nèi)脂肪含量是影響肉質(zhì)的一個(gè)極其重要的指標(biāo)，肝臟脂肪代謝的能力影響其沉積水平。誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡FF45樣效應(yīng)因子C(Celldeath-inducing DFF45-like effectorc，cidec)，在鼠中稱為脂肪特異性因子(Fat-specific protein of27kD，F(xiàn)SP27

2、)與脂肪沉積相關(guān)，在脂肪代謝中起著重要作用。
　　由于豬CIDEC與小鼠的CIDEC有高度的同源性(82.8％)，本研究第一階段先以小鼠為研究對(duì)象，采用RT-PCR，Co-IP，質(zhì)譜分析等方法，篩選在禁食、高脂對(duì)照條件下的肝臟以及對(duì)照條件下的脂肪中CIDEC的互作蛋白。獲得如下結(jié)果:
　　1.在脂肪沉積（高脂喂養(yǎng)）和脂肪動(dòng)員（禁食處理）這一對(duì)相反的進(jìn)程中，肝臟CIDEC的表達(dá)量與甘油三酯(TG)的含量均顯著上升，因此推測CI

3、DEC可能是在脂肪沉積和動(dòng)員中的關(guān)鍵因子。
　　2.利用Co-IP技術(shù)捕獲CIDEC在高脂，禁食，對(duì)照的肝臟和對(duì)照的脂肪組織中的互作蛋白。并進(jìn)行質(zhì)譜篩選，通過DAVID網(wǎng)站對(duì)互作蛋白進(jìn)行蛋白功能，亞細(xì)胞定位，GO，KEGG功能及其富集度等方面的分析。發(fā)現(xiàn)在不同營養(yǎng)和不同組織條件下，CIDEC發(fā)生轉(zhuǎn)位。
　　本研究第二階段以巴馬豬為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，試圖驗(yàn)證CIDEC互作蛋白在豬中是否成立。根據(jù)質(zhì)譜分析的結(jié)果，挑選出八個(gè)差異顯著的互作