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文檔簡介
1、目的:觀察不同尿酸濃度對人骨髓間充質(zhì)干細胞(hBMSCs)成神經(jīng)分化的影響。
方法:取健康成人的骨髓血,體外分離、純化、培養(yǎng)hBMSCs,用倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài),擴增3代的hBMSCs為研究對象,分為完全培養(yǎng)基組(完全培養(yǎng)基)、對照組(0mmol/L尿酸)和干預(yù)誘導(dǎo)組(0.2、0.4、0.8mmol/L尿酸),先用含不同濃度(0、0.2、0.4、0.8mmol/L)尿酸的成神經(jīng)預(yù)誘導(dǎo)液誘導(dǎo)24小時,再用含不同濃度(0、0.2
2、、0.4、0.8mmol/L)尿酸的成神經(jīng)誘導(dǎo)液誘導(dǎo),完全培養(yǎng)基組始終用完全培養(yǎng)基。1小時后行尼氏體染色,2小時后用免疫組織化學(xué)法檢測細胞內(nèi)巢蛋白(Nestin)、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)、中分子量神經(jīng)絲蛋白(neurofilament protein medium,NF-M)的表達。
結(jié)果:hBMSCs經(jīng)誘導(dǎo)后,完全培養(yǎng)基組細胞始終呈長梭形,旋渦狀排列,尼氏體染色陰性。對
3、照組及干預(yù)誘導(dǎo)組細胞的胞體逐漸收縮,突起并與相鄰細胞連成網(wǎng)狀,尼氏體染色陽性,含不同濃度尿酸的誘導(dǎo)組NSE、NF-M陽性率均較對照組明顯升高(P<0.05),而且隨著尿酸濃度增加,其陽性表達率均逐漸增加(P<0.05)。含不同濃度尿酸的誘導(dǎo)組Nestin陽性表達率較對照組明顯降低(P<0.05),而且隨著尿酸濃度增加,其陽性表達率逐漸降低(P<0.05)。誘導(dǎo)4h后,可見細胞明顯脫落。
結(jié)論:在一定條件下,尿酸能夠促進hBMS
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