具有促生抗病能力的纖維素降解真菌的篩選及其促生效果研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)旨在從土壤中篩選出具有纖維素降解、溶磷、產(chǎn)吲哚乙酸并能拮抗部分植物致病菌的真菌，為研發(fā)新型多功能腐熟劑提供基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)以采集自成都市溫江區(qū)和崇州市等地的土壤為材料，采用稀釋平板法分離出其中的真菌，通過定性篩選獲得其中具有纖維素降解、促生、拮抗功能的真菌，并進(jìn)一步定量分析了供試真菌的上述功能。應(yīng)用ITS序列的擴(kuò)增測(cè)序、BLAST比對(duì)，以及對(duì)真菌菌落形態(tài)和菌體形態(tài)的觀察，最終確定這些供試菌株的種屬。采用秸稈腐熟實(shí)驗(yàn)，確定了篩選的菌株秸稈

2、降解能力以及秸稈腐熟物對(duì)作物種子發(fā)芽率的影響，最終篩選出了3個(gè)優(yōu)良菌株，制成混合固體菌劑，盆栽實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了其對(duì)土壤改良效果及對(duì)植物的促生作用。
　　通過定性實(shí)驗(yàn)，從183株真菌中篩選出了9株具有復(fù)合功能的纖維素降解真菌，其編號(hào)分別為WJF17、WJF29、WJF40、WJF43、WJFS17、CZF55、CZF60、CZF63和CZF130。定量實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，這些真菌在液體培養(yǎng)和固體培養(yǎng)時(shí)的CMC酶活性分別為6.19～89.97 U

3、·min-1·mL-1和188.09～605.32 U·min-1·g-1，濾紙酶活性分別為2.25～10.86 U·min-1·mL-1和32.43～127.81 U·min-1·g-1;在添加相當(dāng)于5.0g·L-1磷酸鈣的培養(yǎng)基中，對(duì)磷酸鈣的溶解能力為194.37～1538.19 mg·L-1·3d-1;在添加0.5g·L-1的L-色氨酸的培養(yǎng)基中IAA產(chǎn)量為3.87～12.50μg·mL-1·3d-1。這些真菌均對(duì)供試的致病真菌具

4、有一定的生長(zhǎng)抑制能力，部分對(duì)指示細(xì)菌具有拮抗能力。
　　采用形態(tài)學(xué)和ITS序列分析研究了9個(gè)菌株的分類地位，WJF17和WJF29為黃曲霉(Aspergillus flavus)、WJF40為煙曲霉(Aspergillus fumigatus)、WJF43為黑曲霉(Aspergillus niger)、CZF55為產(chǎn)黃青霉(Penicillium chrysogenum、CZF60為圓弧青霉(Penicillium cyclopi

5、um)、WJFS17為裸節(jié)菌(Talaromyces purpurogenus)、CZF63為哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、CZF130為米根霉(Rhizopus oryzae)，分布于5個(gè)屬8個(gè)種。
　　在秸稈降解試驗(yàn)中，通過測(cè)定秸稈的拉力強(qiáng)度、纖維素含量和半纖維素含量的變化，確定了30d的處理時(shí)期內(nèi)9株真菌的固體菌劑對(duì)小麥秸稈的降解情況。結(jié)果表明，接種供試真菌后秸稈的拉力強(qiáng)度比對(duì)照組降低了1.90％～

6、47.70％，秸稈纖維素含量由約40％降低至6.83％～15.62％，半纖維素含量變化不明顯，秸稈腐熟物的浸提液，對(duì)蔬菜種子的萌發(fā)率的提升效果分別為-3.67％～11.67％。
　　綜合上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，最終篩選出了3株優(yōu)良菌株，黑曲霉(Aspergillus niger)WJF43、產(chǎn)黃青霉(Penicillium chrysogenum) CZF55和裸節(jié)菌(Talaromycespurpurogenus) WJFS17，采用盆栽

7、試驗(yàn)驗(yàn)證其功能，試驗(yàn)設(shè)計(jì)了5個(gè)處理，分別為T1:不加秸稈和菌劑的對(duì)照組，T2:小麥秸稈+固體菌劑，T3:小麥秸稈，T4:腐熟秸稈+固體菌劑，T5:腐熟秸稈。結(jié)果表明，T4處理效果最好，可以有效地提升土壤有機(jī)質(zhì)和微生物碳、氮含量，增幅分別達(dá)到22.2％、46.1％、42.41％，瓢兒菜吸收磷量增加了15.56％，產(chǎn)量增加了47.25％。
　　因此，篩選獲得的WJF43、CZF55和WJFS17是具有纖維素降解能力和促生、拮抗功能的優(yōu)