生姜內(nèi)生細菌分離鑒定及促生效果研究.pdf

1、本文旨在從生姜中分離內(nèi)生細菌，探明其生物多樣性，進而篩選高效植物促生細菌，為開發(fā)內(nèi)植物生細菌資源提供基礎。以采自貴州貴陽、重慶、四川雅安、眉山等地的生姜為材料，采用常規(guī)方法分離生姜內(nèi)生細菌，應用BOX-PCR和16S rDNAPCR-RFLP，16S rDNA序列分析技術(shù)研究生姜內(nèi)生細菌的遺傳多樣性和系統(tǒng)發(fā)育地位，進而篩選具有生防和促生功能的生姜內(nèi)生細菌，探明其產(chǎn)IAA、溶磷和產(chǎn)載體能力，并通過玉米盆栽試驗驗證菌株的促生效果。獲得了以下

2、結(jié)果:
　　1.從采自貴州貴陽、重慶、四川雅安、四川眉山等地的生姜中共分離到57株內(nèi)生細菌，BOX-PCR和16S rDNA PCR-RFLP研究了生姜內(nèi)生細菌的遺傳多樣性，進而選取34株代表菌測定了16S rRNA基因全序列，結(jié)果表明，生姜內(nèi)生細菌具有豐富的遺傳多樣性，分屬于α變形菌綱(α-Proteobacteria)、β變形菌綱(β-Proteobacteria)、γ變性菌綱(γ-Proteobacteria)和厚壁菌門(F

3、irmicutes)的蒼白桿菌屬(Ochrobactrum)、不動桿菌屬(Acinetobacter)、窄食單胞菌屬(Stenotrophomonas)、腸桿菌屬(Enterobacter)、沙雷氏菌屬(Serratia)、假單胞菌屬(Pseudomonas)、芽孢桿菌屬(Bacillus)、土壤桿菌屬(Agrobacterium)以及Tetrathiobacter等9個屬。
　　2.測定了34株代表菌株的生防功能，結(jié)果表明，有1

4、1株內(nèi)生菌拮抗番茄早疫病(Alternaria solani)，14株內(nèi)生菌對小麥赤霉病菌(Fusarium graminearum)有拮抗作用，11株內(nèi)生菌對黃瓜炭疽病菌(Colletotrichum turcium)有拮抗作用;其中7株菌同時能拮抗3種病原菌。34株細菌的促生試驗表明，有16株具有產(chǎn)IAA的能力，包括蒼白桿菌屬(Ochrobactrum)、土壤農(nóng)桿菌屬(Agrobacterium)、不動桿菌屬(Acinetobact

5、er)、窄食單胞菌屬(Stenotrophomonas)、沙雷氏菌屬(Serratia)以及芽孢桿菌屬(Bacillus)的菌株，IAA產(chǎn)量介于1.02-45.35μg/mL之間;18株菌具有產(chǎn)鐵載體的能力，其產(chǎn)鐵載體活性單位為9.47-70.66％之間;16株菌具有溶解無機磷的能力，包括蒼白桿菌屬(Ochrobactrum)、假單胞菌屬(Pseudomonas)、不動桿菌屬(Acinetobacter)、沙雷氏菌屬(Serratia)

6、以及芽孢桿菌屬(Bacillus)的菌株，在添加5g/L Ca-P、2g/L Al-P和1g/L Fe-P的發(fā)酵液中，有效磷含量分別介于9.32-233.05μg/mL、1.14-9.95μg/mL和2.98-55.42μg/mL之間。
　　3.盆栽試驗驗證菌株QW11(Pseudomonas sp.)、QW40(Ochrobactrum sp.)、QW45(Serratia sp.)、QW48(Ochrobactrum sp.)

7、、QW52(Bacillus sp.)和QW57(Pseudomonassp.)其對玉米的促生效果，結(jié)果表明，單接種促生菌，玉米株高、葉面積、地上部分和地下部分干重分別比對照增加17.57-37.61％、20.52-48.54％、25.62-49.64％和6.16-62.72％;植株氮、磷以及鉀含量分別增加26.76-79.18％、26.32-85.53％和8.40-26.59％。接種促生細菌結(jié)合施肥，玉米株高、葉面積、地上部分干重和地