新型吡唑類衍生物合成與抗病毒和抗癌生物活性研究.pdf

1、本論文以 1-取代基-3-甲基吡唑酮為起始原料，經(jīng)多步反應(yīng)，設(shè)計(jì)合成一系列新的含 5-取代硫醚吡唑肟醚類化合物和 5-取代砜吡唑肟醚類化合物(如圖所示)，然后進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征和生物測(cè)定，希望從中篩選出較高抗TMV生物活性的化合物，并對(duì)作用機(jī)理進(jìn)行研究。本論文完成工作歸納為以下幾點(diǎn)結(jié)論： R1=Ph，3-ClPh，4-ClPh，4-CH3Ph；G1=H，F(xiàn)，Me，OMe；G3代表的芳基雜環(huán)，等。 1.目標(biāo)化合物 5-取代硫醚-1-取代

2、基-3-甲基吡唑肟醚衍生物的合成(化合物編號(hào)：以1-取代芳基-3-甲基吡唑酮為原料，通過(guò)POCl3氯化合成了5個(gè)1-取代苯基-3-甲基-5-氯-4-醛基吡唑中間體(中間體M1)，取代苯基-3-甲基-5-氯-4-醛基吡唑(中間體M1)通過(guò)取代的苯硫酚醚化合成了9個(gè)1-取代苯基-3-甲基-5-取代苯硫基-4-醛基吡唑(中間體M3)，1-取代苯基-3-甲基-5-取代苯硫基-4-醛基吡唑(中間體M3)和鹽酸羥胺反應(yīng)合成了9個(gè)1-取代苯基-3-甲

3、基-5-取代苯硫基4-吡唑醛肟(中間體M4)，1-取代苯基-3-甲基-5-取代苯硫基-4-吡唑醛肟(中間體M4)和氯甲基芳雜環(huán)化合物(C1-G3)進(jìn)行醚化反應(yīng)合成了11個(gè)5-取代硫醚-1-取代基-3-甲基吡唑肟醚衍生物，其中有11個(gè)為未見(jiàn)報(bào)道的化合物。對(duì)合成的11個(gè)化合物進(jìn)行了物理常數(shù)的測(cè)定，其結(jié)構(gòu)經(jīng)過(guò)了IR、1H NMR、13C NMR及元素分析確證。 2.目標(biāo)化合物5-取代砜-1-取代基-3-甲基吡唑肟醚衍生物的合成(化合物編號(hào)：P

4、S2) 以吡唑醛肟中間體M4為原料，通過(guò)與氯甲基芳雜環(huán)化合物(C1-G3)進(jìn)行醚化反應(yīng)反應(yīng)，在冰醋酸中用高錳酸鉀室溫條件下可將5-位的硫醚氧化為砜，合成了5個(gè)5-取代砜-1-取代基-3-甲基吡唑肟醚未見(jiàn)報(bào)道的化合物。對(duì)所合成的化合物分別進(jìn)行了物理常數(shù)的測(cè)定，其結(jié)構(gòu)經(jīng)過(guò)了IR、1H NMR、13C NMR及元素分析確證。 3.目標(biāo)化合物5-取代硫醚-1-取代基-3-甲基吡唑肟酯衍生物(化合物編號(hào)：PS3)、5-取代砜-1-取代基-3-甲基

5、吡唑吡唑肟酯類衍生物的合成(化合物編號(hào)：PS4) 以吡唑醛肟中間體M4為原料，通過(guò)與酰氯進(jìn)行酯化反應(yīng)成了14個(gè)5-取代硫醚-1-取代基-3-甲基吡唑肟酯衍生物(化合物編號(hào)：PS3)，在冰醋酸中用高錳酸鉀室溫條件下可將5-位的硫醚氧化為砜，合成了5個(gè)5-取代砜-1-取代基。3-甲基吡唑肟酯未見(jiàn)報(bào)道的化合物。對(duì)所合成的化合物分別進(jìn)行了物理常數(shù)的測(cè)定，其結(jié)構(gòu)經(jīng)過(guò)了IR、1H NMR、13C NMR及元素分析確證。 4.目標(biāo)化合物吡唑酰

6、胺(PS5)及吡唑酰脲類衍生物(PS6)的合成以1-取代基-3-甲基吡唑酮為原料，通過(guò)POCl3氯化合成了5個(gè)1-取代苯基-3-甲基-5-氯-4-醛基吡唑中間體(中間體M1)，通過(guò)高錳酸鉀進(jìn)行氧化反應(yīng)合成了5個(gè)1-取代苯基-3-甲基-5-氯-4-吡唑甲酸(中間體M5)，1-取代苯基-3-甲基-5-氯-4-吡唑甲酸(中間體M5)通過(guò)氯化亞砜加熱回流反應(yīng)合成了5個(gè)1-取代苯基-3-甲基-5-氯-4-吡唑甲酰氯中間體(中間體M6)，通過(guò)26％

7、的氨水酰胺反應(yīng)合成了5個(gè)1-取代苯基-3-甲基-5-氯-4-吡唑甲酰胺中間體(中間體M7)，1-取代苯基-3-甲基-5-氯-4-吡唑甲酰氯和芳胺(G5-NH2)反應(yīng)合成了9個(gè)吡唑酰胺類衍生物(PS5)目標(biāo)化合物；吡唑酰胺(中間體M7)和草酰氯反應(yīng)，通過(guò)含氟芳胺(G5-NH2)進(jìn)行酰脲反應(yīng)含成了10個(gè)吡唑酰脲類衍生物衍生物(PS6)，其中有19個(gè)為未見(jiàn)報(bào)道的化合物。對(duì)合成的19個(gè)化合物分別進(jìn)行了物理常數(shù)的測(cè)定，其結(jié)構(gòu)經(jīng)過(guò)了IR、1H NM

8、R、13C NMR及元素分析確證。 5、標(biāo)化合物吡唑甲胺衍生物(PS8)的合成 1-取代苯基-3-甲基-5-取代苯硫基-4-醛基吡唑(中間體M3)和對(duì)三氟甲基苯胺，加熱回流反應(yīng)，NaBH4進(jìn)行還原反應(yīng)合成了5個(gè)吡唑甲胺衍生物(PS7)目標(biāo)化合物，對(duì)合成的5個(gè)化合物分別進(jìn)行了物理常數(shù)的測(cè)定，其結(jié)構(gòu)經(jīng)過(guò)了IR、1H NMR、13C NMR及元素分析確證。 6.部分目標(biāo)化合物的抗癌活性研究采用MTT法，對(duì)目標(biāo)化合物還進(jìn)行了離體抗癌活性研究，結(jié)

9、果表明部分化合物對(duì)人前列腺癌細(xì)胞(PC3)、人乳腺癌細(xì)胞Bcap37和胃癌細(xì)胞(BGC-823)具有較高的抑制活性。采靂MTT法，目標(biāo)化合物吡唑衍生物對(duì)癌細(xì)胞的IC50值，測(cè)試化合物對(duì)PC3細(xì)胞的IC50值為7.06-46.81μM，對(duì)Bcap-37細(xì)胞的IC50值為1.77-206.18μM，對(duì)BGC-823細(xì)胞的IC50值為7.75-38.35 μM；采用TRYPANBLUE細(xì)胞活力測(cè)定和AO／EB染色熒光顯微鏡觀察PS6-7對(duì)PC

10、3細(xì)胞的細(xì)胞毒性，顯示該化合物在該濃度下作用予PC3沒(méi)有引起細(xì)胞凋亡，同時(shí)造成細(xì)胞死亡較少。 7.部分目標(biāo)化合物的抗TMV活性研究采用半時(shí)法，在藥劑的質(zhì)量濃度均為500 mg/L時(shí)，對(duì)40個(gè)化合物進(jìn)行了活體治療抗煙草花葉病毒活性測(cè)定，測(cè)定結(jié)果表明：化合物PS3-1、PSI-1、PS3-2、PS3-6、PS3-8、PS3-7、PS3-12、PS3-13、PS5-4、PS5-5、PS5-8表現(xiàn)出較高的活體治療作用，抑制率分別為47.8％，4

11、7.0％，40.4％，50.0％，46.4％，47.7％，62.0％，60.0％，44.0％，46.5％，46.0％，PS3-12，PS3-13活性較高，抑制率分別為62.0％，60.0％，略高于商品抗病毒劑寧南霉素(56-58％)?；衔颬S1-1，PS3-2，PS1-7,PS3-8，PS3-12，PS3-13，PS3-14表現(xiàn)出較高的抗煙草花時(shí)病毒鈍化活性，抑制率分別為81.4％，74.1％，80.6％，72.1％，74.6％，73

12、.7％，73.9％，其中PS1-1，PS1-7活性較高，抑制率為81.4％，80.6％，比商品抗病毒劑寧南霉素略低，PS3-2，PS3-8，PS3-12，PS3-13，PS3-14低于PS1-1，PS1-7活性，抑制率分別為74.1％，72.1％，74.6％，73.7％，73.9％，其它化合物抗煙草花葉病毒鈍化活性均低于70％；化合物PS5-7，PS5-5，PS5-2，PS3-6，PS3-10，PS1-7表現(xiàn)出較高的抗煙草花時(shí)病毒保護(hù)活

13、性，其中PS5-7活性較高，比商品抗病毒劑寧南霉素略低，PS5-5,PS5-2，PS3-6，PS3-10，PS1-7低予PS5-7活性(抑制率為59.0％)，抑制率分別為50.0％，45.7％，48.4％，40.9％，43.5％。進(jìn)行了化合物PS3-12處理接種TMV后的煙草植株中，抗TMV的生化研究，結(jié)果表明其PAL酶、POD酶、SOD酶等相關(guān)酶和調(diào)控物質(zhì)在一定的時(shí)間內(nèi)都具有相關(guān)性；對(duì)普通煙PR-5基因的研究，處理已感染TMV天的普通