HMGB1、RAGE、NF-KB在小鼠急性肝衰竭中表達的研究.pdf

1、目的：觀察D-氨基半乳糖(D-GaIN)及脂多糖(LPS)致小鼠急性肝衰竭發(fā)生過程中高遷移率族蛋白B1（HMGB1）、晚期糖基化終末產(chǎn)物受體（RAGE)、核轉(zhuǎn)錄因子（NF-KB）在小鼠肝臟的表達變化，探討HMGB1介導的RAGE/NF-KB信號通路在急性肝衰竭發(fā)病機制中可能的作用。
　　方法：雄性昆明種小鼠64只，隨機分為正常對照4小時、8小時、12小時、24小時組，急性肝衰竭模型4小時、8小時、12小時、24小時組。腹腔同時注射

2、D-Galn500mg/Kg、LPS10ug/Kg制備急性肝衰竭模型，分別在造模4小時、8小時、12小時、24小時末處死小鼠，測定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總膽紅素（TBIL）的含量，觀察肝組織學改變，免疫組化SABC法檢測正常4小時、8小時、12小時、24小時組及相應肝衰竭組小鼠肝組織中HMGB1、RAGE、NF-KBp65的表達情況，并用實時熒光定量PCR（Real time-PCR）的方法測定正常4小時、8小

3、時、12小時、24小時組及相應肝衰竭組小鼠肝組織中HMGB1、RAGE、NF-KBp65的mRNA表達水平變化。
　　結果：急性肝衰竭模型組小鼠血清ALT和AST含量均顯著高于相應正常對照組小鼠，且急性肝衰竭模型8小時、12小時、24小時組小鼠血清TBIL含量顯著高于相應正常對照。病理學觀察，急性肝衰竭4小時組小鼠肝臟肝細胞輕度腫脹、嗜酸性變、炎細胞浸潤,可見核內(nèi)包涵體，肝細胞呈點狀壞死，急性肝衰竭8小時組小鼠肝臟中肝細胞呈橋接壞

4、死，急性肝衰竭12小時組小鼠肝臟中肝細胞片狀壞死融合，核溶解、碎裂，匯管區(qū)及肝細胞間見較多炎細胞浸潤伴少量出血，急性肝衰竭24小時組肝細胞壞死更加明顯，大片狀壞死和少量出血，僅少量肝細胞殘存，散在分布，纖維網(wǎng)狀支架塌陷。免疫組化顯示，急性肝衰竭模型組小鼠肝組織中HMGB1主要表達在肝細胞胞漿和肝細胞壞死區(qū)，HMGB1陽性表達量較相應正常對照組顯著增加，且隨肝衰竭發(fā)展表達明顯增加。急性肝衰竭模型組小鼠肝組織中RAGE主要表達在炎細胞浸潤區(qū)

5、和肝細胞壞死區(qū)，RAGE陽性表達量較相應正常對照組顯著增加。急性肝衰竭模型組小鼠肝組織中NF-κBp65主要表達在炎細胞浸潤區(qū)和肝細胞胞漿。NF-κBp65陽性表達量較相應正常對照組顯著增加，且隨肝衰竭發(fā)展明顯增加。Realtime-PCR檢測結果顯示，急性肝衰竭模型組小鼠肝組織HMGB1mRNA表達量顯著高于相應正常對照組，且隨肝衰竭發(fā)展增加。急性肝衰竭模型組小鼠肝組織RAGEmRNA表達量顯著高于相應正常對照組，且隨肝衰竭發(fā)展升高。