能量限制對(duì)大鼠胰島素抵抗和SIRT1和SIRT4表達(dá)的影響.pdf

1、目的：為了更深入的研究熱量限制(Caloric Restriction, CR)與能量代謝之間的調(diào)節(jié)關(guān)系，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)高熱量飲食誘導(dǎo)了大鼠胰島素抵抗模型，并與能量限制大鼠做對(duì)比。于此同時(shí)，本實(shí)驗(yàn)還探索在不同飲食配方喂養(yǎng)下SIRT1和SIRT4 在大鼠胰腺的表達(dá)，并研究了SIRT1和SIRT4與胰島素抵抗的聯(lián)系。
　　 方法：SIRT4的表達(dá)量CR 大鼠胰腺與NC 大鼠比較沒(méi)有明顯差別，但是在Hfa和HFr 組卻較NC 組降低方法：

2、48 只體重200±20g的8 周齡成年雄性SD 大鼠被隨機(jī)的分成四個(gè)飲食組：A、正常對(duì)照組：自由進(jìn)食大鼠飼料；B、限制飲食組：進(jìn)食量為同期正常組的60%；C、高脂組：自由進(jìn)食高脂飼料（10%豬油，3%蛋黃，1%膽固醇，0.5%膽酸鹽，85.5%粉末大鼠飼料）；D、高果糖組：自由進(jìn)食高果糖飼料（66%的能量由果糖提供）。每籠一只，自由飲水。每天稱重并記錄進(jìn)食量，以便及時(shí)調(diào)整CR的給食。每?jī)芍軓慕?6h的大鼠尾靜脈抽血，血清經(jīng)離心后被分

3、離出來(lái)并存放于-20 ℃冰箱，集中測(cè)量空腹血糖，空腹胰島素，膽固醇和甘油三酯水平。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，按照每公斤體重1 克糖,分別給四組大鼠灌高糖溶液，通過(guò)尾靜脈取血測(cè)量灌胃前，灌胃后30,60,120min的血糖。次日，將大鼠麻醉后從心臟抽血，斷頭處死大鼠，剖開(kāi)腹腔，胰腺，腎周和附睪脂肪被迅速分離并稱重，后兩者之和反映了腹內(nèi)脂肪的含量。通過(guò)免疫組化來(lái)檢測(cè)SIRT1和SIRT4 在大鼠胰腺β細(xì)胞的位置。通過(guò)免疫印跡法來(lái)測(cè)量胰腺中SIRT1和S

4、IRT4 蛋白的表達(dá)量。
　　 結(jié)果：高糖和高脂配方飲食均誘導(dǎo)了大鼠高糖血癥、高胰島素血癥、高脂血癥和腹部肥胖。相反的，CR 組大鼠則表現(xiàn)得相對(duì)健康一些，因?yàn)樗鼈冊(cè)隗w重，空腹胰島素水平，膽固醇，甘油三酯，腹內(nèi)脂肪和曲線下面積（AUC ）的數(shù)值是最低的。SIRT1 出現(xiàn)在胰腺細(xì)胞的胞核和胞漿，SIRT4 主要出現(xiàn)在胞漿。SIRT1 蛋白在CR 大鼠胰腺的表達(dá)量較其他三組都高（P<0.01 ），在Hfa和HFr 大鼠皆與NC 組沒(méi)有