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文檔簡介
1、目的:胰島素抵抗(IR)是指生理或病理原因致使胰島素促進葡萄糖攝取、利用的效率下降,機體代償性的分泌過多胰島素產生高胰島素血癥,以維持血糖的穩(wěn)定?,F(xiàn)有研究表明,線粒體功能障礙可能是引起IR及相關代謝性疾病的主要因素,而運動干預可以提高線粒體功能。位于線粒體內的沉默信息調節(jié)因子4(silenceinformation negulator4,Sirt4)已被證實與胰島素分泌有關。為了深入闡明運動干預IR的線粒體機制、明確運動對Sirt4的影
2、響,本實驗通過建立高脂飲食誘導的IR大鼠有氧運動模型,探究胰島素抵抗及有氧運動后Sirt4及其底物谷氨酸脫氫酶(glutamate dehydrogenase,GDH)、胰島素降解酶(insulin-degrading enzyme,IDE)、腺嘌呤核苷酸轉運蛋白2(adenine nucleotide translocator2,ANT2)在大鼠肝臟的表達及其與胰島素抵抗的相互聯(lián)系。
方法:選取2月齡Wistar大鼠,普通飼
3、料適應性喂養(yǎng)1周后隨機分為普通(基礎飼料:脂肪、蛋白質、碳水化合物熱卡含量分別為10%、21%、69%,n=20)組和建模(高脂飼料:脂肪、蛋白質、碳水化合物熱卡含量分別為59%、20%、21%,n=20)組,建模飼養(yǎng)5周。將建模成功的IR大鼠隨機分為高脂安靜組(IR)和高脂運動組(IRe),將普通組大鼠隨機分為普通安靜(N)組和普通運動組(Ne)。先進行適應性轉輪訓練1周,后采用Bedford方案的第二級負荷進行轉輪運動,每周5次,共
4、運動6周。6周訓練結束后進行高胰島素正葡萄糖鉗夾實驗驗證建模成功,大鼠股動脈取血后進行甘油三酯、膽固醇等相關生化指標的測定,通過免疫印跡法來測量肝臟中Sirt4及其底物的表達情況;采用雙因素分析方法對生化指標、Sirt4及其底物GDH、IDE、ANT2的蛋白表達量進行分析。
結果:(1)高脂飲食誘導了大鼠IR。運動期結束后,與N組相比,Ne組體重明顯降低(P<0.01),IRe組大鼠體重較N組明顯降低(P<0.05);與IR組
5、相比IRe組大鼠體重較IR組相比有顯著性降低(P<0.01)。與N組相比,Ne組、IR組和IRe組大鼠Ins有明顯升高(P<0.01);與IR組相比,IRe組大鼠Ins有顯著增高(P<0.05)。IR組大鼠TG較N組明顯增高(P<0.05)。而IR組大鼠CHOL較N組明顯增高(P<0.05)。(2)大鼠肝臟蛋白表達分析結果顯示,與N組相比,Ne組、IR組大鼠Sirt4蛋白明顯降低(P<0.05),而IRe組大鼠Sirt4較N組相比降低極
6、為顯著(P<0.01);與IR組相比,IRe組大鼠Sirt4蛋白表達明顯降低(P<0.05)。與IR組相比,Ne組和IRe組大鼠GDH蛋白表達明顯升高(P<0.05)。IR組大鼠IDE蛋白表達較N組有明顯升高(P<0.05);與IR組相比,IRe組大鼠IDE表達明顯降低(P<0.05)。
結論:(1)有氧運動能夠在一定程度上改善IR大鼠生理生化指標的不良變化,進而改善IR狀態(tài)。(2)大鼠IR及有氧運動均可以誘導肝臟Sirt4蛋
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