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文檔簡介
1、 目的:分析膝關(guān)節(jié)韌帶成纖維細胞的生物學(xué)特性和觀察酸性成纖維細胞生長因子(acid fibroblast growth factor, aFGF)、堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)、表皮生長因子(epidermal growth factor,EGF)和內(nèi)皮細胞生長因子(endothelial cell growth factor,ECGF)對其增殖行為的影響。
2、 方法:采用膠原酶消化培養(yǎng)法或組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)原代新西蘭大白兔的膝關(guān)節(jié)前十字韌帶(anterior cruciate ligament,ACL)、內(nèi)側(cè)副韌帶(medial collateral ligament,MCL)及人膝關(guān)節(jié)ACL細胞,選擇合適的條件進行體外培養(yǎng),觀察膝關(guān)節(jié)韌帶成纖維細胞的生物學(xué)特性;在培養(yǎng)液中分別加入aFGF、bFGF、EGF和ECGF,以XTT法測定細胞的增殖行為。
結(jié)果:在含體積分數(shù)為10%胎牛血
3、清的DMEM培養(yǎng)液中細胞生長良好、增殖快。在體外培養(yǎng)條件下兔ACL和MCL細胞形態(tài)相似,都具成纖維細胞表型,但MCL細胞較ACL細胞生長快;兩種細胞合成膠原的總量相同,相對于MCL細胞,ACL細胞合成的Ⅰ型膠原多而Ⅲ型膠原較少。人ACL細胞在體外亦具成纖維細胞表型,免疫細胞學(xué)方法檢測表明人ACL細胞Ⅰ、Ⅲ型膠原及纖維連接蛋白表達呈陽性。aFGF、bFGF、EGF和ECGF四種生長因子對兔膝關(guān)節(jié)韌帶成纖維細胞有明顯的促增殖作用,在某一濃度
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