烤瓷合金對人牙齦成纖維細胞生物學(xué)行為的影響.pdf

1、目的：探討鎳鉻烤瓷合金、鈷鉻烤瓷合金和金鉑烤瓷合金，以及鎳鉻烤瓷合金表面鍍金對體外培養(yǎng)的人牙齦成纖維細胞(HGF)分泌免疫細胞因子白細胞介素-6(IL-6)、生長與增殖活性以及附著生長能力等生物學(xué)行為的影響。從而評價其生物相容性，為臨床烤瓷合金的選擇提供參考。 方法： 1.于臨床取得正常牙齦組織，采用組織塊貼壁法進行人牙齦成纖維細胞的原代培養(yǎng)，運用細胞免疫組織化學(xué)染色方法通過波形絲蛋白、角蛋白染色鑒定細胞來源。

2、2.用不同烤瓷合金提浸液分別對人牙齦成纖維細胞進行培養(yǎng)，以未處理的DMEM培養(yǎng)液作為陰性對照。通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)抗體加心法測定細胞培養(yǎng)上清液中IL-6的分泌量；通過四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色法(MTT)檢測烤瓷合金提浸液對人牙齦成纖維細胞生長與增殖的影響。 3.以蓋玻片接種細胞作為陰性對照，在不同烤瓷合金表面分別接種人牙齦成纖維細胞。采用MTT法檢測人牙齦成纖維細胞在不同烤瓷合金表面的附著生長與增殖活性；掃描電

3、鏡觀察細胞形態(tài)與排列附著情況。 結(jié)果： 1.細胞免疫組織化學(xué)染色，波形絲蛋白染色陽性、角蛋白染色陰性，證實細胞符合中胚層來源的成纖維細胞特點。 2.不同烤瓷合金提浸液培養(yǎng)人牙齦成纖維細胞，ELISA結(jié)果顯示：6小時細胞培養(yǎng)上清液中IL-6的濃度均值分別為：對照組：133.75±12.50pg/ml，鎳鉻烤瓷合金組(A)：180.00±10.36 pg/ml，鈷鉻烤瓷合金組(B)：168.50±10.08 pg/m

4、l，鎳鉻烤瓷合金鍍金組(C)：145.00±8.90 pg/ml，金鉑烤瓷合金組(D)：138.75±10.31 pg/ml。A、B組與對照組之間有顯著性差異；C、D組與對照組之間無顯著性差異；A組與B組、C組與D組比較，無顯著性差異；A組與C組、A組與D組、B組與C組、B組與D組兩兩比較，有顯著性差異。 24小時對照組與A、B、C、D組細胞上清液中IL-6的濃度均值分別為：189.50±10.12pg/ml，228.75±8.

5、54pg/ml，223.75±7.50pg/ml，200.50±9.57pg/ml，196.50±10.79pg/ml。A、B組與對照組之間有顯著性差異；C、D組與對照組之間無顯著性差異；A組與B組、C組與D組比較，無顯著性差異；A組與C組、A組與D組、B組與C組、B組與D組兩兩比較，有顯著性差異。 3.不同烤瓷合金提浸液培養(yǎng)人牙齦成纖維細胞，MTT比色實驗結(jié)果顯示：與對照組相比，6小時鎳鉻烤瓷合金組(A)，鈷鉻烤瓷合金組(B)

6、，鎳鉻烤瓷合金鍍金組(C)，金鉑烤瓷合金組(D)細胞相對增殖率均值分別為：113.07±4.16％，110.50±4.55％，102.57±4.36％，99.00±3.17％。A、B組與對照組之間有顯著性差異；C、D組與對照組之間無顯著性差異；A組與B組、C組與D組比較無顯著性差異；A組與C組、A組與D組、B組與C組、B組與D組兩兩比較，有顯著性差異。與對照組相比，24小時A、B、C、D組細胞相對增殖率分別為：78.89±6.03％，8

7、2-33±4.44％，95.36±4.17％，97.92±5.83％。A、B組與對照組之間有顯著性差異；C、D組與對照組之間無顯著性差異；A組與B組、C組與D組比較，無顯著性差異；A組與C組、A組與D組、B組與C組、B組與D組兩兩比較，有顯著性差異。 4.不同烤瓷合金表面人牙齦成纖維細胞的MTT比色結(jié)果顯示：與對照組相比，鎳鉻烤瓷合金組(A)，鈷鉻烤瓷合金組(B)，鎳鉻烤瓷合金鍍金組(C)，金鉑烤瓷合金組(D)細胞相對增殖率分別

8、為：69.39±3.71％，75.00±5.03％，86.72±3.55％，89.27±3.88％。A、B、C、D組與對照組之間均有顯著性差異；A組與B組、C組與D組比較，無顯著性差異；A組與C組、A組與D組、B組與C組、B組與D組兩兩比較，有顯著性差異。 5.掃描電鏡觀察人牙齦成纖維細胞黏附行為：與對照組相比，鎳鉻烤瓷合金(A)，鈷鉻烤瓷合金(B)，鎳鉻烤瓷合金鍍金(C)，金鉑烤瓷合金(D)表面附著細胞數(shù)目少，顯示細胞極性，沿

9、材料表面溝紋方向排列。A、B、C組細胞形態(tài)變化明顯。D組細胞形態(tài)變化不明顯。 結(jié)論： 1.體外成功培養(yǎng)了人牙齦成纖維細胞。 2.鎳鉻烤瓷合金和鈷鉻烤瓷合金提浸液對人牙齦成纖維細胞的增殖顯示先促進后抑制作用；并且使細胞IL-6分泌水平升高。鎳鉻烤瓷合金鍍金與金鉑烤瓷合金提浸液不影響細胞細胞的增殖活性和IL-6的分泌水平。 3.鎳鉻烤瓷合金、鈷鉻烤瓷合金、鎳鉻烤瓷合金鍍金和金鉑烤瓷合金均抑制人牙齦成纖維細胞的