阿霉素熱敏脂質體穿越血腦-血瘤屏障的研究.pdf

1、本研究通過使用一種新型的藥物遞送系統(tǒng)——熱敏脂質體遞送系統(tǒng),對腦部進行靶向遞送,試圖提高藥物在腦部聚集濃度,增強藥效以及降低對全身的毒副作用。由于腦部存在血腦屏障,使得大部分藥物無法透過,因而無法起到治療作用,這也是困擾腦部疾病治療的難題之一。
　　 以提高藥物的血腦屏障透過性為目的,將藥物制成熱敏脂質體包裹形式,利用熱敏脂質體的熱敏釋藥特性,提高其包裹藥物的腦部靶向性;同時考察了熱敏脂質體作為腦部藥物遞送的可能性及機制。

2、>　　 體內血腦屏障透過實驗成本高、實驗周期長、易受多種不確定因素的影響,因此我們選擇先建立體外細胞模型,對體內血腦屏障進行模擬,在此基礎上對遞送系統(tǒng)進行篩選優(yōu)化。通過實驗摸索,建立了基于正常星形膠質細胞的體外血腦屏障模型和基于膠質瘤細胞系的血瘤屏障模型,分別用于模擬正常狀況下的血腦屏障和病理狀況下的血瘤屏障。
　　 建立體外血腦屏障(blood-brain barrier,BBB)模型和體外血瘤屏障(blood-braint

3、umor barrier,BTB)模型,檢測阿霉素兩種劑型(Thermosensitive liposome.Adriamycin,ts-lip-ADM和阿霉素溶液)在37℃/42℃條件下對兩種模型的穿透性,為阿霉素熱敏脂質體腦靶向藥物遞送研究奠定基礎。采用人臍靜脈內皮細胞系ECV304和星形膠質細胞(Astrocytes,As)接觸共培養(yǎng)建立共培養(yǎng)BBB模型;ECV304細胞和膠質瘤細胞系C6非接觸共培養(yǎng)建立共培養(yǎng)BTB模型。測定模型

4、的跨內皮阻抗值(Trans-endothelialelectrical resistance,TEER)和阿霉素通透性確證模型建立。建模第7天,測定阿霉素兩種劑型在37℃/42℃條件下對兩種模型的透過性(Papp)。BBB模型的TEER值顯著高于BTB模型,對ADM的透過量低于BTB模型。42℃加熱條件下熱敏脂質體在BBB和BTB模型中的藥物透過量顯著高于阿霉素溶液。熱敏脂質體結合加熱處理可以顯著促進阿霉素穿越體外血腦/血瘤屏障。

5、>　　 在體外實驗的基礎上,接著進行了一系列的體內實驗,作為對體外實驗的驗證和補充。首先進行了活體成像實驗,對熱敏脂質體的腦部靶向性進行定性研究。實驗結果顯示,熱敏脂質體結合熱療,具有一定的腦部靶向性,帶有熒光探針的熱敏脂質體在加熱后在腦部聚集。推測熱敏脂質體能夠提高藥物對血腦屏障的透過性。由于實驗條件和時間的限制,沒有建立腦部膠質瘤體內模型,只能通過對昆明小鼠腿部的腫瘤模型進行藥效學研究。結果顯示熱療結合熱敏脂質體技術可以在機體的局