地塞米松調(diào)控AKT-mTOR-RhoA信號通路影響乳腺癌T47D細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)和遷移的作用機(jī)制研究.pdf

1、本文主要從以下幾個部分展開論述：
　　第一部分 AKT、mTOR、RhoA在乳腺癌組織中的表達(dá)及意義
　　背景:
　　乳腺癌是嚴(yán)重危害女性生命健康安全的常見惡性腫瘤之一。我國乳腺癌發(fā)展趨勢亦不容樂觀。盡管自1990年至今，全球范圍內(nèi)乳腺癌的死亡率已降低了34％，患者的5年生存率上升到90％，但乳腺癌的致死率依然高居所有女性惡性腫瘤的第二位。在最近的幾十年中，我國乳腺癌患者的發(fā)病年齡逐漸趨于年輕化，且發(fā)病率亦逐年上升，惡

2、性化程度也在不斷升高。目前學(xué)界對造成乳腺癌發(fā)病的原因、發(fā)病機(jī)制以及轉(zhuǎn)移機(jī)制并不十分清楚，因而給乳腺癌的早期預(yù)防、診斷、治療以及預(yù)后的評價造成了非常大的影響。
　　目的:
　　本研究對乳腺癌組織中AKT、mTOR、RhoA基因及其相應(yīng)蛋白的表達(dá)情況進(jìn)行測定，通過分析上述基因與乳腺癌臨床病理參數(shù)間的相關(guān)性，判斷上述基因是否能夠作為臨床診斷以及預(yù)后的指標(biāo)。
　　方法:
　　(1)運(yùn)用熒光定量PCR法對50例乳腺癌組織及

3、癌旁相應(yīng)正常組織中AKT、mTOR、RhoA mRNA的表達(dá)情況進(jìn)行檢測;
　　(2)運(yùn)用western blot法對50例乳腺癌組織及癌旁相應(yīng)正常組織中AKT、mTOR、RhoA蛋白的表達(dá)情況進(jìn)行檢測;
　　(3)分析AKT、mTOR、RhoA蛋白與臨床各病理參數(shù)之間的相關(guān)性，判斷三者是否能夠作為臨床診斷以及預(yù)后的指標(biāo)。
　　結(jié)果:
　　(1)熒光定量PCR結(jié)果表明，乳腺癌組織中AKT、mTOR、RhoA mR

4、NA的表達(dá)顯著高于癌旁相應(yīng)正常組織(P＜0.01);
　　(2) western blot檢測結(jié)果表明，乳腺癌組織中AKT、mTOR、RhoA蛋白的表達(dá)顯著高于癌旁相應(yīng)正常組織(P＜0.01);
　　(3) AKT、mTOR、RhoA蛋白的表達(dá)與患者年齡、腫瘤大小無關(guān)(P＞0.05)，而與病理分期、腦轉(zhuǎn)移以及骨轉(zhuǎn)移相關(guān)(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　AKT、mTOR、RhoA在乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展以及轉(zhuǎn)移過程中

5、起到了促癌基因的作用。
　　第二部分 地塞米松調(diào)控AKT/mTOR/RhoA信號通路影響乳腺癌T47D細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)和遷移的作用機(jī)制研究
　　背景:
　　地塞米松(dexamethasone，Dex)屬于腎上腺皮質(zhì)激素，為臨床常用藥，具有抗炎、抑制免疫、抗休克和提高應(yīng)激反應(yīng)等功效，廣泛應(yīng)用于臨床上各科疾病的治療。在臨床惡性腫瘤的治療中，Dex還能夠減輕化療藥物對造血系統(tǒng)的毒性，同時降低化療藥物對骨髓抑制的不良反應(yīng)。國內(nèi)外

6、大量研究均證實(shí)，聯(lián)合Dex能夠提高化療敏感性，從而起到更好的抗腫瘤作用?；谏鲜鲈?，Dex被廣泛應(yīng)用于惡性腫瘤的治療中。研究表明，Dex與其他化療藥物聯(lián)用能夠有效治療乳腺癌以及提高患者生存率。
　　目的:
　　本研究旨在探討Dex調(diào)控AKT/Mtor/RhoA信號通路影響乳腺癌T47D細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)以及遷移的作用機(jī)制，為臨床上治療乳腺癌開辟新途徑。
　　方法:
　　將不同濃度的Dex作用于T47D細(xì)胞，通過細(xì)胞劃

7、痕實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力，MTT法檢測細(xì)胞的增殖能力，流式細(xì)胞術(shù)檢測對細(xì)胞凋亡的影響;免疫熒光法檢測對細(xì)胞骨架的影響;western blot檢測細(xì)胞中AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR、RhoA蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　(1)Dex對人乳腺癌細(xì)胞株T47D的遷移具有抑制作用，且呈劑量依賴性;
　　(2)Dex對T47D細(xì)胞的增殖以及細(xì)胞凋亡無顯著影響;
　　(3)Dex能夠影響T47D細(xì)胞的