TLR4在內(nèi)毒素致大鼠肺炎癥和氣道黏液高分泌中的作用研究.pdf

1、本研究分為三部分：第一部分：內(nèi)毒素致大鼠肺炎癥和氣道黏液高分泌的研究目的觀察細(xì)菌內(nèi)毒素(LPS)誘發(fā)大鼠肺炎癥和氣道黏液高分泌的作用及其特點(diǎn)，并探討肺炎癥與黏液分泌發(fā)生的相互關(guān)系。 方法：SPF級(jí)SD大鼠24只，隨機(jī)分為2組，LPS組和生理鹽水組各12只。通過(guò)檢測(cè)LPS組大鼠氣管注入LPS后第2、4、7天肺組織炎癥指標(biāo)包括肺炎癥積分、支氣管肺泡灌洗液(BALF)中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、巨噬細(xì)胞計(jì)數(shù)、TNF-α、IL-1β及IL-8含量和

2、氣道黏液分泌指標(biāo)包括肺組織阿先藍(lán)一過(guò)碘酸雪夫(AB-PAS)陽(yáng)染面積、免疫組化黏蛋白Muc5ac及逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)MucSacmRNA的表達(dá)，對(duì)LPS誘發(fā)大鼠肺炎癥和氣道黏液高分泌的改變進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察。 結(jié)果：與生理鹽水對(duì)照組比較，LPS組肺炎癥反應(yīng)指標(biāo)于第2天上升到高峰，第4天和第7天逐漸下降；氣道黏液分泌指標(biāo)于第2天開(kāi)始升高，第4天達(dá)到高峰，第7天下降。 結(jié)論：氣管注入LPS可誘發(fā)大鼠肺炎癥和氣道黏

3、液高分泌，并呈現(xiàn)動(dòng)態(tài)變化，肺炎癥反應(yīng)的高峰(第2天)早于氣道黏液分泌的高峰(第4天)，肺炎癥反應(yīng)可能伴隨并導(dǎo)致氣道黏液高分泌的發(fā)生。 第二部分：TLR4在內(nèi)毒素致大鼠肺炎癥中的作用及地塞米松干預(yù)治療的研究目的觀察TLR4、TLR2在LPS致大鼠肺炎癥中的作用及地塞米松干預(yù)的影響，并探討其可能的機(jī)制。 方法：SPF級(jí)SD大鼠48只，隨機(jī)分為4組，LPS組、地塞米松干預(yù)組、生理鹽水組和地塞米松自身對(duì)照組各12只。檢測(cè)各組大鼠

4、在干預(yù)后第2、4、7天肺組織炎癥指標(biāo)包括肺炎癥積分、支氣管肺泡灌洗液(BALF)中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、巨噬細(xì)胞計(jì)數(shù)、TNF-α、IL-1β及IL-8含量和肺組織免疫組化TLR4、TLR2表達(dá)及RT-PCRTLR4mRNA、TLR2mRNA表達(dá)以及肺組織TLR4mRNA原位雜交檢測(cè)。 結(jié)果：肺組織TLR4蛋白及TLR4mRNA表達(dá)于LPS刺激后第2天上升達(dá)到高峰，第4天和第7天明顯下降。地塞米松干預(yù)組肺組織炎癥指標(biāo)和肺組織TLR4蛋白、

5、TLR4mRNA表達(dá)于LPS刺激后第2、4、7天均較LPS組明顯下降(P＜0.05)。地塞米松自身對(duì)照組和生理鹽水組肺組織炎癥指標(biāo)和肺組織TLR4蛋白、TLR4mRNA表達(dá)的組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。肺組織TLR2蛋白、TLR2mRNA表達(dá)在各組未檢出。 結(jié)論：LPS誘導(dǎo)肺組織TLR4表達(dá)介導(dǎo)肺炎癥反應(yīng)，地塞米松可以抑制肺組織TLR4mRNA及其蛋白的表達(dá)而減輕LPS誘發(fā)的大鼠肺炎癥反應(yīng)。TLR2可能未參與LPS誘發(fā)的大鼠肺炎癥損傷

6、反應(yīng)。 第三部分：TLR4在內(nèi)毒素致大鼠氣道黏液高分泌中的作地塞米松干預(yù)治療的研究目的觀察TLR4在LPS致大鼠氣道黏液高分泌中的作用及地塞米松干預(yù)的影響，并探討其可能的機(jī)制。 方法：SPF級(jí)SD大鼠48只，隨機(jī)分為4組，LPS組、地塞米松干預(yù)組、生理鹽水組和地塞米松自身對(duì)照組各12只。檢測(cè)各組大鼠在干預(yù)后第2、4、7天肺組織AB-PAS陽(yáng)染面積、免疫組化黏蛋白Muc5ac及RT-PCRMuc5acmRNA表達(dá)等氣道黏液

7、分泌指標(biāo)和肺組織免疫組化TLR4、TLR2表達(dá)及RT-PCRTLR4mRNA、TLR2mRNA表達(dá)。 結(jié)果：LPS組氣道黏液分泌指標(biāo)AB-PAS陽(yáng)染面積、黏蛋白Muc5ac及Muc5acmRNA表達(dá)于LPS刺激后第2天上升，第4天達(dá)到高峰，第7天下降。地塞米松干預(yù)組氣道黏液分泌指標(biāo)和肺組織TLR4蛋白、TLR4mRNA表達(dá)于LPS刺激后第2、4、7天均較LPS組明顯下降。地塞米松自身對(duì)照組和生理鹽水組氣道黏液分泌指標(biāo)和肺組織TL