聯(lián)合應(yīng)用骨髓基質(zhì)細(xì)胞和還原型谷胱苷肽治療帕金森大鼠實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、■lI’|’7a1281、r7812e。糾犬博士學(xué)位論文(2005屆)聯(lián)合應(yīng)用骨髓基質(zhì)細(xì)胞和還原型谷胱苷肽治療帕金森大鼠實(shí)驗(yàn)研究TreatmentwithBoneMarrowStromalCelIsandReducedGlutathioneInARatParkinson’DiseaseModel研究生姓名指導(dǎo)教師姓名專業(yè)名稱羅蔣鋒包仕堯(教榭神經(jīng)病學(xué)研究方向帕金森病基礎(chǔ)與臨床論文提交日期2005年5其聯(lián)合應(yīng)用骨髓摹質(zhì)細(xì)胞和還原型谷胱苷肽

2、治療帕金森人鼠實(shí)驗(yàn)研究巾文摘要道。本研究的目的：1、進(jìn)行大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞的體外培養(yǎng)及鑒定；2、應(yīng)用還原型谷胱苷肽對骨髓基質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)分化，觀察神經(jīng)元特異性烯醇化酶的表達(dá)。3、應(yīng)用6羥多巴胺建立簡單、易行、成功率高的帕金森病大鼠模型。4、探討聯(lián)合應(yīng)用骨髓基質(zhì)細(xì)胞和還原型谷胱苷肽治療帕金森病大鼠的療效及機(jī)制。第一部分大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞的體外培養(yǎng)及鑒定目的：觀察大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞在體外培養(yǎng)的條件，為誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)分化形成神經(jīng)元，以及移植骨髓基質(zhì)細(xì)

3、胞治療帕金森病大鼠奠定基礎(chǔ)。方法：取6090gSD大鼠，體外培養(yǎng)骨髓基質(zhì)細(xì)胞，利用倒置相差顯微鏡觀察原代及不同傳代細(xì)胞生長形態(tài)特點(diǎn)，并應(yīng)用流式細(xì)胞儀鑒定原代及不同傳代細(xì)胞表型。結(jié)果：培養(yǎng)的骨髓基質(zhì)細(xì)胞第3代，骨髓基質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞表面標(biāo)志CD90表達(dá)陽性的細(xì)胞已占到929％。造血干細(xì)胞的表面標(biāo)志CD45表達(dá)陽性的細(xì)胞已從原代的734％降低到23％。結(jié)論：傳代3的細(xì)胞適合于細(xì)胞誘導(dǎo)分化，可作為理想細(xì)胞移植治療的細(xì)胞來源。關(guān)鍵詞：SD大鼠骨髓基

4、質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)第二部分應(yīng)用還原型谷胱苷肽誘導(dǎo)大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞分化形成神經(jīng)元的研究目的研究還原型谷胱苷肽對大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞的誘導(dǎo)分化作用。方法用SD大鼠股骨、脛骨以及肱骨骨髓細(xì)胞體外培養(yǎng)。采用還原型谷胱苷肽誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)細(xì)胞24h，免疫細(xì)胞化學(xué)染色評價(jià)神經(jīng)元特異性烯醇化酶表達(dá)率。結(jié)果誘導(dǎo)6h、24h時(shí)，骨髓基質(zhì)細(xì)胞分化形成神經(jīng)細(xì)胞樣細(xì)胞，形成網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)構(gòu)，免疫細(xì)胞化學(xué)染色誘導(dǎo)出的神經(jīng)細(xì)胞樣細(xì)胞神經(jīng)元特異性烯醇化酶表達(dá)陽性分別為64％4f3％、