大鼠自體脂肪干細(xì)胞聯(lián)合基質(zhì)膠移植治療心肌梗死的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：建立大鼠自體脂肪干細(xì)胞移植治療心肌梗死的動(dòng)物模型并探討脂肪干細(xì)胞聯(lián)合基質(zhì)膠治療心肌梗死可能機(jī)制。
　　 方法：SD大鼠150只，首先行自體脂肪干細(xì)胞提取手術(shù)，分離、培養(yǎng)、鑒定脂肪干細(xì)胞，行干細(xì)胞成脂、成骨及成心肌誘導(dǎo)誘導(dǎo)分化，3周后建立心肌梗死模型，選擇縮短分?jǐn)?shù)（fractional shortening，F(xiàn)S）＜40%的SD 大鼠，隨機(jī)分4組：單純注射PBS組、單純注射Matrigel 膠組、PBS+ADSCs組以及AD

2、SCs+Matrigel 膠組，以Matrigel 膠為可注射性載體，ADSCs 為種子細(xì)胞，4 周后進(jìn)行大鼠心梗部位移植。移植后對(duì)心梗面積、左心室室壁厚度、心梗部位微血管密度、ADSCs 在心梗部位分化情況等指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，并利用心臟超聲、血流動(dòng)力學(xué)對(duì)心梗大鼠的心臟功能進(jìn)行測(cè)定。應(yīng)用免疫組織化學(xué)、免疫熒光、Western blot等方法評(píng)價(jià)其改善心臟功能可能機(jī)制。
　　 結(jié)果：⑴150只SD大鼠行脂肪干細(xì)胞提取手術(shù)、心肌梗死模型

3、建立及2 次開胸手術(shù)后，剩余65 只：單純注射PBS 組（n=12）、單純注射基質(zhì)膠組（n=17）、注射PBS+ADSCs 組（n=18）、注射基質(zhì)膠+ADSCs組（n=18）。⑵成功分離ADSCs 并且通過流式細(xì)胞術(shù)表明大多數(shù)分離的脂肪干細(xì)胞CD90 抗體陽性、CD105 抗體陽性、CD45 抗體和CD34 抗體陰性；⑶脂肪干細(xì)胞能夠經(jīng)過誘導(dǎo)分化成成脂、成骨、成心肌細(xì)胞；⑷PBS+ADSCs 組以及ADSCs+Matrigel 膠組在

4、室壁厚度、梗死面積、梗死區(qū)域微血管形成能力與PBS 組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，以ADSCs+Matrigel 膠組最為顯著(p＜0.01)。⑸ADSCs 移植到大鼠心臟4周后，可以分化為cTnT陽性細(xì)胞、Nkx2.5陽性細(xì)胞以及vWAg陽性細(xì)胞。⑹心功能檢測(cè)結(jié)果表明PBS+ADSCs 組同ADSCs+Matrigel 膠組一樣，具有心梗修復(fù)能力。
　　 結(jié)論：Matrigel 膠作為ADSCs 載體，能顯著提高移植細(xì)胞在注射區(qū)域的存

5、活。移植后4 周，可以顯著改善心梗大鼠的心臟功能、減少心梗面積、增加室壁厚度并提高微血管密度。心功能檢測(cè)結(jié)果表明PBS+ADSCs 組同ADSCs+Matrigel 膠組一樣，具有心梗修復(fù)能力，以ADSCs+Matrigel 膠組修復(fù)效果最好。免疫熒光結(jié)果表明ADSCs 移植到大鼠心臟4周后，可以分化為cTnT陽性細(xì)胞、Nkx2.5陽性細(xì)胞以及vWAg陽性細(xì)胞。Western blot檢測(cè)表明再心肌梗死區(qū)域中相關(guān)蛋白含量以ADSCs+M