赤芍拮抗內(nèi)毒素活性物質(zhì)的分離及生物學(xué)活性研究.pdf

1、目的內(nèi)毒素(LPS)是革蘭陰性(G-)菌細胞外膜重要組成部分，是介導(dǎo)膿毒癥的主要病原分子。已證實中藥赤芍具有很強的抗LPS作用，本室已從赤芍中分離出具有拮抗LPS作用的單體化合物1，2，3，4，6-O-五沒食子酰-β-D-葡萄糖(PGG)，但PGG是一種鞣質(zhì)，使其潛在的藥用價值受到質(zhì)疑。本研究旨在尋找赤芍中的非鞣質(zhì)類的抗LPS活性成分。 方法(1)對已建立的生物傳感器技術(shù)篩選赤芍中抗LPS有效成分的技術(shù)平臺進行完善與優(yōu)化。(2)

2、以生物傳感器技術(shù)和薄層色譜技術(shù)為指導(dǎo)，建立赤芍抗LPS成分的有效提取方法。(3)利用高效液相色譜技術(shù)(HPLC)從赤芍中定向分離出具有拮抗LPS作用的活性組分。(4)對分離出的活性組分進行物質(zhì)屬性的鑒定，確定出赤芍中的非鞣質(zhì)類的抗LPS活性成分，對其進行拮抗LPS活性的藥理學(xué)評價。 結(jié)果(1)完善了以LipidA為靶點、應(yīng)用生物傳感器技術(shù)篩選赤芍中拮抗LPS活性成分的技術(shù)平臺，與傳統(tǒng)的鱟試劑法比較，具有操作穩(wěn)定、省時、干擾因素少

3、等優(yōu)點。 (2)利用生物傳感器技術(shù)完成了對不同產(chǎn)地赤芍拮抗LPS活性的篩選，確定出產(chǎn)地為四川的赤芍片劑中拮抗LPS活性成分的含量最高。 (3)對四川赤芍的三種煎制方法的比較結(jié)果顯示，用醇提法的提取效果為最好。 (4)從四川赤芍中定向分離出6個具有與LipidA結(jié)合活性的組分，物質(zhì)屬性的檢測顯示，第4組分的活性物質(zhì)主要為屬鞣質(zhì)的PGG，其余的5個組分均為非鞣質(zhì)類物質(zhì)。對各組分的體內(nèi)外拮抗LPS作用研究顯示：第1、4