黃芪多糖的提取、分離、純化及其生物學(xué)活性研究.pdf

1、黃芪是一種常用的中藥。含有多糖、蛋白質(zhì)、生物堿、氨基酸、黃酮類、甙類、微量元素等多種生物活性物質(zhì)，其中黃芪多糖(Astragaluspolysaccharides，APS)是黃芪主要生物活性成分。黃芪多糖具有增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能，強(qiáng)心降壓、降血糖、抗應(yīng)激、抗腫瘤、抗病毒、抗輻射、抗氧化等多種藥理功效。由于黃芪多糖的多種生物活性及良好的臨床效果，多年來(lái)在國(guó)內(nèi)外已成為中藥提取及中草藥現(xiàn)代化研究的焦點(diǎn)之一。 巨噬細(xì)胞在宿主防御反應(yīng)中起了

2、重要的作用，是天然免疫應(yīng)答的主要參與者。激活的巨噬細(xì)胞能抑制多種腫瘤細(xì)胞和病原微生物的生長(zhǎng)。另外，巨噬細(xì)胞還可作為抗原呈遞細(xì)胞與T細(xì)胞相互作用來(lái)調(diào)節(jié)適當(dāng)?shù)拿庖邞?yīng)答。巨噬細(xì)胞還參與胚胎期組織再塑、創(chuàng)傷修復(fù)、凋亡細(xì)胞的清除以及血細(xì)胞的生成。 研究表明黃芪多糖具有免疫調(diào)節(jié)作用。但對(duì)黃芪多糖的研究都是以總的多糖為研究對(duì)象，而尚未見對(duì)黃芪多糖進(jìn)行分離，然后研究其對(duì)巨噬細(xì)胞細(xì)胞因子生成和釋放的報(bào)道。為了探索黃芪多糖各級(jí)分對(duì)巨噬細(xì)胞細(xì)胞因子生

3、成和釋放的影響，本課題通過提取、分離、純化得到不同分子量的黃芪多糖，然后將各級(jí)分黃芪多糖直接作用于巨噬細(xì)胞，運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)的方法，觀察其對(duì)巨噬細(xì)胞細(xì)胞因子IL_1β、TNF-α和GM-CSF分泌的影響。同時(shí)將上述不同分子量級(jí)分黃芪多糖進(jìn)行整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，通過酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)血清中細(xì)胞因子IL_1β、TNF-α和GM-CSF的含量，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和體外實(shí)驗(yàn)相結(jié)合，進(jìn)一步闡明黃芪多糖對(duì)巨噬細(xì)胞功能的影響以及增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的

4、機(jī)理。 黃芪多糖的制備結(jié)果顯示：100g黃芪飲片通過水浴浸提，濃縮(濃縮液體積50ml，糖濃度為0.06g/ml，含糖量為60％)，醇沉后所得的粗多糖，經(jīng)超濾分離為分子量小于3萬(wàn)、3萬(wàn)到5萬(wàn)之間、大于5萬(wàn)三個(gè)不同組分，質(zhì)量分別為1.4g、1.6g、1.45g，硫酸—苯酚法測(cè)定糖含量，三部分分別含糖0.7g、1.12g、1.17g，其中分子量3萬(wàn)到5萬(wàn)之間和大于5萬(wàn)兩個(gè)組分中糖的含量較高，含糖量分別為70％、81％。 EL