HL-60細(xì)胞凋亡的衍射圖像量化參數(shù)初步研究.pdf

1、細(xì)胞凋亡是生物體維持正常生理功能的重要機制，是一系列基因調(diào)控下的細(xì)胞死亡途徑。自1972年Kerr等人首次提出細(xì)胞凋亡的概念后，對細(xì)胞凋亡發(fā)生機理和途徑的研究已經(jīng)成為國內(nèi)外生命科學(xué)以及醫(yī)學(xué)研究中方興未艾的熱點。經(jīng)過幾十年的研究，細(xì)胞凋亡在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的作用逐漸被揭開。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞的增殖、衰老、癌變及許多疾病的發(fā)生密不可分。尤其在各種癌癥的治療過程中，癌細(xì)胞的增殖狀態(tài)、敏感性、轉(zhuǎn)移傾向及復(fù)發(fā)幾率均與凋亡指數(shù)相關(guān)。
　　隨著生物檢測技

2、術(shù)的不斷發(fā)展，細(xì)胞凋亡的檢測方法也日趨精密，根據(jù)凋亡過程中細(xì)胞的形態(tài)及生化特征的變化，可以將檢測方法分為形態(tài)學(xué)檢測法、免疫組化檢測法及生化檢測法。這些方法可以從定性或定量的角度反映出細(xì)胞凋亡過程中的特征變化，有助于人類對凋亡引起的相關(guān)疾病進行診斷與治療。
　　基于細(xì)胞凋亡的基本理論知識以及現(xiàn)有檢測方法存在的不足，本文提出了基于衍射成像式流式細(xì)胞儀和灰度共生矩陣(GLCM)的方法對HL-60細(xì)胞進行凋亡衍射圖像量化參數(shù)分析。主要工作

3、如下：
　　本文利用活性氧H2O2誘導(dǎo)饑餓同步化后的HL-60細(xì)胞作為研究樣本，首先利用傳統(tǒng)的熒光流式細(xì)胞儀檢測不同誘導(dǎo)時間下的細(xì)胞凋亡率，分析其曲線變化規(guī)律。其次，利用Hoechst33342、Annexin V-FITC/PI三種熒光試劑對樣本進行染色，拍攝二維熒光圖像，統(tǒng)計不同時間點的細(xì)胞凋亡情況，并利用 Xcellence軟件進行二維參數(shù)的定量提取及顯著性分析。繼而，本文利用衍射成像式流式細(xì)胞儀獲取樣本側(cè)向散射光的水平偏振