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文檔簡介
1、研究目的和方法: 1.利用酵母雙雜交技術(shù),以hPWTSR為誘餌在文庫分離其相互作用蛋白,通過對(duì)其相互作用蛋白組成的分析初步預(yù)測hPWTSR可能的功能及其功能特性。 2.利用基于RT-PCR的表達(dá)譜分析比較胃癌組織與對(duì)應(yīng)組織的hPWTSR的mRNA水平,通過對(duì)臨床性狀與表達(dá)譜的關(guān)系分析來初步探討hPWTSR作為胃癌癌標(biāo)的潛在價(jià)值。 結(jié)果: 1.掃描10<'7>個(gè)獨(dú)立克隆分離到57個(gè)hPWTSR的相互作用克隆
2、。PCR在57個(gè)克隆獲得擴(kuò)增,隨后的序列分析發(fā)現(xiàn)57個(gè)獨(dú)立的陽性克隆代表12個(gè)基因產(chǎn)物。其中包括黏附相關(guān)蛋白基因ARDM1、RPSA和接頭相關(guān)蛋白復(fù)合體Mul亞基AP2M1,腫瘤相關(guān)基因TACC2、SH3GL21和MAGEAl,蛋白質(zhì)合成相關(guān)蛋白R(shí)PS9、RPS15、HSPCA、EXOSC和細(xì)胞漿HSP90A,蛋白質(zhì)代謝相關(guān)蛋白PSMB4。酵母交配試驗(yàn)驗(yàn)證上述作用。 2.基于RT-PCR的表達(dá)譜分析發(fā)現(xiàn),hPWTSR在胃癌細(xì)胞系
3、和臨床標(biāo)本中的表達(dá)水平有不同程度的下降。但在測序分析中我們沒有發(fā)現(xiàn)任何hPWTSR突變的現(xiàn)象。 結(jié)論: 1.hPWTSR的相互作用蛋白譜提示其參與細(xì)胞黏附、信號(hào)傳導(dǎo)等多種生物學(xué)過程,因而可能與腫瘤的發(fā)生、轉(zhuǎn)移具有一定的功能聯(lián)系。 2.hPWTSR在胃癌細(xì)胞系和胃癌樣本中的表達(dá)水平不同程度下降提示其是一個(gè)潛在的胃癌標(biāo)記物。 3.hPWTSR在胃癌發(fā)生及發(fā)展過程中的分子作用機(jī)制及確切的臨床價(jià)值有待進(jìn)一步的功能
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