黃芪對(duì)高糖環(huán)境下人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞ACE2,Apelin,APJ表達(dá)的影響.pdf

1、目的:檢測(cè)高糖環(huán)境下人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2(ACE2)、Apelin、APJ mRNA的表達(dá),以及黃芪對(duì)其表達(dá)的影響,探尋ACE2, Apelin, APJ對(duì)HUVECs的作用機(jī)制及黃芪的保護(hù)機(jī)制。
　　方法:原代培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,以不同濃度的葡萄糖(15mmol/L、25mmol/ L、45mmol/L)分別培養(yǎng)4h、12h、24h、48h、72h和不同濃度的黃芪注射液(0.1g/L、0.2g/L

2、、0.3g/L)培養(yǎng)24h后,按照培養(yǎng)結(jié)果分為:對(duì)照組、高糖組、低濃度黃芪組(低濃度黃芪+高糖)、高濃度黃芪組(高濃度黃芪+高糖),Cell Counting Kit-8(CCK-8)檢測(cè)HUVECs的增殖活力;倒置相差顯微鏡下觀察HUVECs的形態(tài)變化;逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)ACE2、ACE、Apelin、APJ、eNOS mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果:隨著葡萄糖濃度的升高以及刺激時(shí)間的延長(zhǎng),HUVECs的增值活力

3、逐漸降低。與對(duì)照組相比,高糖組細(xì)胞增值活力明顯降低(P0.01);鏡下可見細(xì)胞形態(tài)改變;ACE2、Apelin、APJ mRNA的表達(dá)均降低(P0.05),ACE mRNA表達(dá)顯著升高(P0.01),eNOS mRNA的表達(dá)明顯降低(P0.01)。與高糖組相比,低濃度黃芪組和高濃度黃芪組細(xì)胞增值活力升高(P0.05);鏡下可見細(xì)胞形態(tài)明顯改善;ACE2、Apelin、APJ mRNA的表達(dá)增高(P0.05),ACE mRNA表達(dá)降低(P

4、0.05),eNOS mRNA的表達(dá)增高(P0.05)。在不同藥物干預(yù)的細(xì)胞中eNOS與ACE mRNA的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.981,P=0.007);eNOS與ACE2、Apelin、APJ mRNA的表達(dá)呈正相關(guān)(r分別為0.920、0.992、0.970,P0.05)。
　　結(jié)論:高糖引起血管內(nèi)皮細(xì)胞ACE2、Apelin、APJ mRNA表達(dá)的降低,ACE mRNA表達(dá)的升高,可能是高糖引起血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的原因之一。