大豆皂苷的分離檢測.pdf

1、大豆皂苷是大豆中含有的一類重要的生物活性成分。近年研究表明，大豆皂苷具有顯著的降血脂和抗動脈粥樣硬化等多種重要的生理功能，可開發(fā)成保健食品或藥品，同時它還是一種重要的發(fā)泡劑、乳化劑、穩(wěn)定劑和風味改良劑，市場潛力大。本文以脫脂大豆胚芽為原料，通過溶劑浸提，大孔吸附樹脂（MAR）與陽離子交換樹脂（CER）聯(lián)用富集、純化總皂苷，凝膠滲透色譜（GPC）進一步去雜，利用制備高效液相色譜（PRE-HPLC），蒸發(fā)光散射檢測器（ELSD）與二極管陣列

2、檢測器（PAD）并用，液相色譜-質譜（LC-MS）聯(lián)用分析，分離，制備大豆皂苷單體。在此基礎上，建立了大豆皂苷的高效液相色譜（HPLC）內標定量方法與苷元比色定量方法。主要研究內容如下： ⑴成功分離出了5種大豆皂苷單體，通過高效液相色譜-電噴霧電離質譜（LC-ESI/MS）方法分析確認其各自皂苷種類。5種皂苷單體分別為大豆皂苷Aa，Ab，Ba，Bb，Be。通過ELSD-HPLC分析，5種大豆皂苷單體的峰面積百分數都高達95％以上

3、。 ⑵建立了以馬萘雌酮為內標物，通過ELSD-HPLC內標法測定大豆皂苷Ab、Bb的定量方法。各自分別在0.1～0.5mg/Ml范圍內呈良好的線性關系。大豆皂苷Ab線性回歸方程為：lgy=1.6658lgx-0.7123，R2=0.9995?；厥章试?8.2％～100.3％之間，具有較高的回收率、穩(wěn)定性和重現性。大豆皂苷Bb線性回歸方程為：lgy=1.8734lgx-0.9667，R2=0.9998?；厥章试?7.7％～100.

4、2％之間，具有較高的回收率、穩(wěn)定性和重現性。通過大豆皂苷Ab可定量A組大豆皂苷，通過大豆皂苷Bb可定量B組大豆皂苷。并通過此兩組皂苷計算大豆總皂苷含量。 ⑶以香草醛-高氯酸為顯色劑、冰醋酸為溶劑，自制高純度大豆皂苷Bb為標準品，通過大豆皂苷苷元顯色，在563nm處測定大豆皂苷元的含量，建立了利用大豆皂苷元特征顯色方法定量測定大豆總皂苷含量的方法。在0.0106～0.0743μmol皂苷元范圍內呈良好的線性關系，回歸方程為y=12