人參皂苷Re改善脂代謝的作用機(jī)制研究.pdf

1、[目的]研究人參皂苷Re對(duì)db/db小鼠脂代謝的影響，并探尋其可能的作用機(jī)制。
　　[方法]18只雄性基因缺陷的肥胖db/db小鼠，隨機(jī)分為Re處理組和對(duì)照組。適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，分別予以40mg/kg的Re或等體積溶媒每日一次腹腔注射，每日定時(shí)記錄小鼠的體重和攝食量。給藥8周后，眼眶采集血標(biāo)本，用以測(cè)定血脂含量，頸椎脫臼法處死小鼠，并快速剪取小鼠肝臟、皮下脂肪、內(nèi)臟脂肪組織，稱重后置于-80℃冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆谩Ｍ瑫r(shí)剪取部分組織放入4

2、％的多聚甲醛固定液中固定，行石蠟包埋和HE染色，觀察各組織細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化。提取各組織RNA及蛋白質(zhì)，Real-timePCR和Western-blot的方法研究脂代謝相關(guān)信號(hào)通路基因和蛋白水平的變化。
　　[結(jié)果](1)給藥前兩組小鼠體重?zé)o顯著差異(39.194±1.151g VS39.286±0.854g，P＞0.05)，但給藥第2周開始，Re處理組小鼠體重顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)，這種差異一直持續(xù)到實(shí)驗(yàn)結(jié)束;(2)Re處

3、理組小鼠每日平均攝食量與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異(P＞0.05);(3)Re處理組小鼠肝臟、皮下脂肪、內(nèi)臟脂肪組織重量均顯著低于對(duì)照組(P＜0.05);(4)Re處理組小鼠肝臟、皮下脂肪、內(nèi)臟脂肪組織重量占相應(yīng)體重的比例顯著低于對(duì)照組(P＜0.05);(5)Re處理組db/db小鼠血清中甘油三酯(Triglyceride TG)、總膽固醇(Total cholesterol TC)的含量顯著低于對(duì)照組(P＜0.05);(6)測(cè)定肝臟組織中甘

4、油三酯含量結(jié)果顯示:Re處理組db/db小鼠肝內(nèi)脂肪含量顯著低于對(duì)照組(P＜0.05);(7)肝臟組織HE染色結(jié)果觀察:Re處理組肝臟組織中脂肪沉積顯著少于對(duì)照組;(8)皮下脂肪、內(nèi)臟脂肪組織Real-time PCR結(jié)果示，Re處理組與對(duì)照組相比，MCAD、LCAD及CPT1β等與脂肪酸氧化代謝相關(guān)的多個(gè)基因mRNA水平顯著上調(diào)(P＜0.05);(9)肝臟組織Real-time PCR結(jié)果示:Re處理組MCAD、LCAD及CPT1β等

5、與脂肪酸氧化相關(guān)基因的mRNA水平較對(duì)照組顯著上調(diào)(P＜0.05)，但FAS、C/EBPβ等與脂肪生成相關(guān)基因的mRNA表達(dá)水平較對(duì)照組顯著下調(diào);(10) Western-blot結(jié)果示:Re處理組小鼠肝臟組織中P-AMPK的表達(dá)水平顯著上調(diào)。
　　[結(jié)論](1)Re不影響db/db小鼠的攝食，但可顯著抑制其體重增加;(2) Re能顯著降低db/db小鼠血清甘油三酯和膽固醇的含量;(3)Re能顯著改善db/db小鼠肝臟組織脂肪的沉