人參皂苷Rg1抗心肌肥大作用及其機(jī)制.pdf

1、目的：從細(xì)胞和分子水平研究人參皂苷Rg1對血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ，AngⅡ)、前列腺素F2α(prostaglandinF2α,PGF2α)誘導(dǎo)心肌肥厚的作用及其可能的作用機(jī)制。 方法：主要利用體外培養(yǎng)的SD乳鼠心肌細(xì)胞，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要隨機(jī)分成正常對照組、模型組、陽性對照藥精氨酸(L-arg10-3mol·L-1)組、Rg1高劑量(50μg·ml-1)組、Rg1中劑量(25μg·ml-1)組、Rg1低劑量(12.5

2、μg·ml-1)組、Rg1高劑量(50μg·ml-1)+L-NAME(10-3mol·L-1)組和L-arg10-3mol·L-1+L-NAME(10-3mol·L-1)組。以心肌細(xì)胞直徑、蛋白含量、ANFmRNA的表達(dá)為心肌肥大標(biāo)志，采用不同的方法檢測了下列指標(biāo)：(1)通過HE染色用BI圖像分析系統(tǒng)測定細(xì)胞直徑觀察心肌細(xì)胞肥大情況。(2)利用Ca2+熒光指示劑Fura-2/AM負(fù)載心肌細(xì)胞檢測細(xì)胞內(nèi)游離Ca2+濃度([Ca2+]i)的

3、變化；(3)Bradford蛋白濃度測定試劑盒檢測心肌細(xì)胞蛋白含量的變化;(4)一氧化氮試劑盒檢測細(xì)胞上清液中一氧化氮(nitricoxide，NO)的含量；(5)采用real-timePCR觀測心房利鈉因子(atrialnatriureticfactor,ANF)、鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(calcineurin，CaN)和一氧化氮合成酶(nitricoxidesynthase，eNOS)mRNA的表達(dá)。 結(jié)果：AngⅡ(10-7mol

4、/L)和PGF2α(10-7mol/L)均不同程度誘導(dǎo)心肌細(xì)胞肥大。人參皂苷Rg112.5、25、50μg/ml呈濃度依賴地抑制心肌細(xì)胞肥大，使AngⅡ所增大的心肌細(xì)胞直徑分別縮小13％、33％、43％(P＜0.001)；使AngⅡ所升高的心肌細(xì)胞蛋白含量分別減少了10％(P＜0.01)、14％、19％(P＜0.001，n=6)；也明顯抑制AngⅡ引起的[Ca2+]i升高，抑制率分別為19.3％、28％、和38.6％(P＜0.001，n

5、=6);細(xì)胞上清液中NO的含量測定結(jié)果顯示：Rg1同樣呈濃度依賴地促進(jìn)心肌細(xì)胞NO的釋放，而且該作用可被一氧化氮合成酶抑制劑NG-硝基-L-精氨酸-甲酸(NG-nitro-L-arginine-methylester,L-NAME)所阻斷;人參皂苷Rg150μg/ml使ANF、CaNmRNA的表達(dá)降低;使eNOSmRNA的表達(dá)顯著升高(P＜0.01)。Rg1對PGF2α誘導(dǎo)心肌細(xì)胞肥大也呈現(xiàn)與AngⅡ一致的作用。 結(jié)論：Rg1能